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文檔簡介
1、目的:
探討HELQ對人骨肉瘤細胞DNA損傷修復及惡性表型的影響及分子機制。方法:
構建靶向HELQ的慢病毒載體(Lv-shHELQ、Lv-HELQ)和陰性對照載體,分別轉(zhuǎn)染人骨肉瘤細胞系143B和U2-OS細胞,陰性慢病毒轉(zhuǎn)染為陰性對照。轉(zhuǎn)染48h后,分別運用Transwell實驗、劃痕實驗、CCK8實驗和彗星實驗檢測人骨肉瘤細胞的侵襲、遷移、增殖能力以及細胞中DNA損傷水平。運用熒光定量PCR實驗檢測細胞中HEL
2、QmRNA表達水平,WesternBlot實驗檢測細胞中HELQ、CHK1以及RAD51蛋白表達水平。
結果:
骨肉瘤細胞系143B和U2-OS細胞中HELQmRNA表達水平明顯低于成骨細胞,而HELQ蛋白表達水平卻明顯高于成骨細胞。與陰性對照組相比,下調(diào)HELQ的表達水平可以顯著增強骨肉瘤細胞的侵襲、遷移以及增殖能力,而上調(diào)HELQ的表達水平可以顯著抑制骨肉瘤細胞的侵襲、遷移以及增殖能力;上調(diào)HELQ的骨肉瘤細胞中
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