mba論文釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的rapd分析與基因工程改造pdf

1、分類號豳3 = 3 3U D C碩士學位論文密級公本釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的R A P D分析與基因工程改造曹樹威學科專業(yè) 微生物堂指導老師 黃旦這麴拯論文答辯日期2 Q ! 三生§且2 2 旦 學位授予日期2 Q ! 圣生魚且墊毋答辯委員會主席 值勇強熬攫釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的R A P D 分析與基因工程改造摘要甘蔗糖蜜作為我國南方蔗糖產區(qū)主要的乙醇發(fā)酵工業(yè)生產原料，具有低成本，不耗糧，并可解決制糖業(yè)污染等優(yōu)點，對其

2、乙醇發(fā)酵的研究一直是研究的重點，其中很關鍵的問題是獲得高性能的菌種，菌株的鑒定及選育具有重要意義。因此本論文工作主要從兩方面展開，首先選擇單細胞形態(tài)及甘蔗糖蜜乙醇發(fā)酵表型不同的7 株釀酒酵母工業(yè)菌株為研究對象，利用R A P D 技術進行核基因組多態(tài)性分析鑒定，以探討釀酒酵母核基因組多態(tài)性與相關性狀的關系；然后以全基因組分析為基礎進一步對菌株進行改造，以選育高性能的甘蔗糖蜜乙醇發(fā)酵釀酒酵母菌種。為滿足實驗進程要求，本實驗建立了一種P C

3、 R 模板高通量制備法，可以在3m i n 內完成一株釀酒酵母的P C R 模板制備工作。I T S 擴增及測序結果證實該法擴增目標條帶的專一性。釀酒酵母不同長度核基因的擴增及R A P D 擴增，證實該法相對于C T A B 基因組法，具有時間短，操作簡單等優(yōu)勢?；赑 C R 模板高通量制備法進行R A P D 實驗，先對2 2 種隨機引物進行篩選。利用8 種引物對7 株釀酒酵母工業(yè)菌株進行R A P D 分析，結果表明，系列菌株間

4、的相似性系數(shù)在0 ．4 7 ．0 ．9 6 之間，高產菌株1 0 1 5 ．0 4 ．0 1 與高產菌株1 0 0 2 ．0 3 ．0 3 之間的相似性最高，而高產菌株1 0 1 5 ．0 4 ．0 1 與低產菌株1 4 1 5 相似．性最低。利用U P G M A 法進行聚類分析，高產菌株1 0 1 6 ．0 2 ．0 4 ，低產菌株1 4 1 5及低產菌株1 3 1 3 聚為一大類，而1 4 1 5 與1 3 1 3 又聚為一小類，