可逆溶解的N-(2-羧基苯甲酰基)殼聚糖固定化脂肪酶的制備和表征.pdf

1、脂肪酶是一種羧酸酯水解酶,能催化三酰基甘油水解,生成甘油和游離脂肪酸。另外,它還具有水解作用、醇解作用、酯化作用、轉(zhuǎn)酯作用以及酯交換作用等,被廣泛運(yùn)用于生物技術(shù)的各個(gè)領(lǐng)域,如乳制品工業(yè)、油脂工業(yè)、化妝品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)、化學(xué)工業(yè)等。
　　脂肪酶固定于不溶性固體載體的技術(shù),可以更好的對(duì)其分離提取,增加了酶的穩(wěn)定性,提高酶的重復(fù)利用性。因此酶的固定化技術(shù)被廣泛應(yīng)用。酶的固定化方法多種多樣,大致可以分為兩類:一是物理方法,可以在

2、酶和載體之間形成較弱的結(jié)合作用;二是化學(xué)方法,即在酶和載體之間以共價(jià)鍵結(jié)合起來(lái)。具體有四種固定化方法,包括將酶吸附在不溶性材料上,包埋或包封在聚合物基質(zhì)中,使用雙功能試劑進(jìn)行交聯(lián),或共價(jià)連接到不溶性固體載體上。但在酶的固定化過程中,會(huì)出現(xiàn)一些新的問題,如在非均相反應(yīng)體系中出現(xiàn)空間位阻和擴(kuò)散障礙,導(dǎo)致酶的催化活力降低,不利于反應(yīng)的進(jìn)行。為了克服這些困難,我們可以采用一種具有可逆溶解性能的載體固定化酶,在溶解狀態(tài)中發(fā)揮酶的催化活性,而通過改

3、變?nèi)鐪囟?、pH等外部條件,使酶恢復(fù)到不溶狀態(tài),從而達(dá)到酶的提取分離的目的。
　　殼聚糖是由大部分的D-氨基葡萄糖和少量的N-乙酰-D-氨基葡萄糖以β-(1,4)糖苷鍵連接起來(lái)的直鏈狀高分子化合物,是一類獨(dú)特的天然多糖類生物高分子,自然界中含量極為豐富,僅次于纖維素。殼聚糖分子鏈上含有豐富的游離氨基和羥基,易發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且具有良好的生物相容性、生物降解性、可再生性、可加工性等,因此被廣泛運(yùn)用于工業(yè)、醫(yī)藥業(yè),而且可以用來(lái)作為固定化酶

4、的良好載體。
　　在本文中,通過將2-羧基苯甲酰基引入到殼聚糖 N端的葡聚糖氨基上,制成 N-(2-羧基苯甲?；?殼聚糖。這種殼聚糖衍生物通過 pH的變化,可展現(xiàn)出可逆溶解性能,以其作為固定化載體,通過戊二醛交聯(lián)的方法將脂肪酶固定,得到的固定化脂肪酶具有很大的潛在應(yīng)用價(jià)值。通過本文對(duì)固定化載體、固定化脂肪酶和游離脂肪酶的比較研究可知,可逆溶解的N-(2-羧基苯甲酰基)殼聚糖在 pH在3.8以上處于溶解狀態(tài),而在3.4以下處于不溶狀