環(huán)氧化酶抑制劑對Her-2高表達(dá)的人胃癌細(xì)胞NCI-N87增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　1探討環(huán)氧化酶-2(COX-2)抑制劑對體外培養(yǎng)Her-2高表達(dá)的人胃癌細(xì)胞NCI-N87的抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡影響。
　　2初步探討COX-2抑制劑下調(diào)Her-2蛋白表達(dá)機(jī)制。
　　方法：
　　1常規(guī)培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞NCI-N87。
　　2不同濃度的塞來昔布(celecoxib)作用于人胃癌細(xì)胞NCI-N87，應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)比

2、色法測定細(xì)胞光密度值(optical density，OD)，計(jì)算出生長抑制率。研究celecoxib對人胃癌細(xì)胞NCI-N87增殖的影響。
　　3采用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry，F(xiàn)CM)檢測 celecoxib對NCI-N87細(xì)胞周期分布及凋亡的影響。
　　4采用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytoetry，F(xiàn)CM)檢測MGC803、NCI-N87細(xì)胞的Her-2蛋白的表達(dá)情況及celecoxib對NCI-N87細(xì)胞H

3、er-2蛋白表達(dá)的影響。
　　5采用細(xì)胞免疫組化法SP(streptavidin-perosidase)法檢測NCI-N87的Her-2蛋白的表達(dá)情況及celecoxib對NCI-N87細(xì)胞Her-2蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　1不同濃度的celecoxib(10umol/l、20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l、100 umol/l)作用NCI-N87細(xì)胞24h、48h、72h后可抑制細(xì)胞

4、的增殖。在10 umol/l-100umol/l濃度范圍內(nèi)隨濃度的增加，抑制作用逐漸增強(qiáng)，且隨著celecoxib作用時(shí)間的延長，抑制作用也逐漸加強(qiáng)。與對照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。說明celecoxib對NCI-N87細(xì)胞的抑制作用呈時(shí)間-劑量依賴關(guān)系。
　　2不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)可誘導(dǎo)NCI-N87細(xì)胞的凋亡，48小時(shí)凋亡率分別為23.69±

5、0.29％、36.32±0.38％、42.40±0.55％。且隨著celecoxib濃度的增加，NCI-N87細(xì)胞的凋亡率逐漸增加，與對照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　3不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)作用于NCI-N87細(xì)胞48小時(shí)后，能使G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯上升，S期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯下降，使細(xì)胞周期停滯于G1期，與對照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)

6、，塞來昔布對人胃癌細(xì)胞NCI-N87 G2期細(xì)胞百分比無明顯影響，與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　4不同濃度的celecoxib(20 umol/l、40 umol/l、80 umol/l)作用于NCI-N87細(xì)胞48小時(shí)后，可以下調(diào)Her-2蛋白的表達(dá)，且隨著濃度的增加下調(diào)也增加，與對照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1塞來昔布可抑制體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞NCI-N87細(xì)胞增