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1、西北大學(xué)碩士學(xué)位論文色譜餅的優(yōu)化設(shè)計及其在生物工程中的應(yīng)用姓名:嚴坤平申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):化學(xué)(分析化學(xué))指導(dǎo)教師:耿信篤20040601OptimizedDesignandApplicationsofChromatographicCakeinBioengineeringAbstractThethesisincludesthreeparts1Accordingtothemethodforevaluatingtheresolution
2、ofsmallsolutes,thecharactersofbiopolymerseparationhydrophobicinteractionchromatographicmediapackedinchromatographiccakewastestedandwasfoundtherolefortheformerdoesnotfollowtothelatterBasedontheshortcolumntheoryofbiopolyme
3、rseparation,theoriginalliquiddistributorwhichissimplycalledasdistributorwasimprovedandtestedwitIlvariousmethodsWhenthecompositionofmobilephasewasselectedastheobtainedcapacityfactorFofBSAabout10,thetotallyadsorbedamountof
4、BSAbythechromatographiccakewithsizeof10mminthicknessand20mmindiametercompanyingwithimproveddistributorwas443mgor338%morethanfromtheoriginalone。Inaddition,twonewmethodsforpackingthechromatographicmediainthechromatographic
5、cakewerealsosuggestedand、ⅣitIloneofthem,thetotallyadsorbedamountofBSAwasfoundtoraise8,36mgor675%morethantheoriginalmethod。2AmethodforrenaturationwithsimultaneouspurificationofrhG—CSFbyweakanionexchangechromatography(WAX)
6、ispresentedinthisstudyTherhGCSFaSinclusionbodieswhichWaSexpressedbyEcoliWaSdissolvedandreducedbyhighconcentrationofureaand13mercaptoethanol(B—ME),wasdirectlyinjectedintoaWAXcakeandrenaturedwitllsimultaneouslypurifiedinth
7、epresenceofasuitableconcentrationofureaandreducedglutathione熄SH)andoxidizedglutathione(GSSG)ThechromatographicconditionswerealsooptimizedTheobtainedrhGCSFwithspecificactivityof19108U/mgandpurityofabove95%WaSaccomplishedi
8、n30minbyonlyonestepThemethodCannormallyworkwhenprecipitatesformduringsampleinjection,TheprecipitateswhichdepositonthehitCanberedissolvedperiodicallyandrefoldedagainbytheWAXchromatographiccake,andthemassandbioactivityreco
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