菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的構(gòu)建.pdf

1、牡丹（Paeoniasuffruticosa）是我國(guó)十大傳統(tǒng)名花之一，歷來(lái)是富貴、吉祥的象征。經(jīng)過(guò)人們長(zhǎng)達(dá)2000年的栽培、選育，目前，牡丹的品種資源已達(dá)到千余種。如此豐富的品種資源給資源保存及新品種選育工作提供了雄厚的物質(zhì)基礎(chǔ)，但同時(shí)也帶來(lái)了巨大的工作量。核心種質(zhì)的建立則很好的解決了這個(gè)問(wèn)題。
　　 自Frankel提出核心種質(zhì)概念以來(lái)，核心神質(zhì)作為一種研究種質(zhì)資源的有效方法越來(lái)越多的得到應(yīng)用。目前全世界已在不同程度上建立了大

2、田作物、園藝、牧草等作物及部分觀賞植物的核心種質(zhì)。
　　 牡丹作為中國(guó)傳統(tǒng)十大名花之首，構(gòu)建其核心種質(zhì)非常有價(jià)值。菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的構(gòu)建，不僅有利于菏澤市、山東省優(yōu)良品種的保存，更為牡丹新品種的研究人員選擇優(yōu)良品種進(jìn)行雜交提供了一條捷徑。
　　 本研究以菏澤地區(qū)牡丹340個(gè)品種為研究對(duì)象，采用表型性狀分析法和分子標(biāo)記法兩種方法，構(gòu)建了核心種質(zhì)。表型性狀分析法主要利用了實(shí)地調(diào)查所得的每個(gè)牡丹品種的20個(gè)性狀，在5個(gè)指標(biāo)

3、上比較了20種取樣策略的優(yōu)劣，找出了最佳取樣策略。分子標(biāo)記法則主要利用了RAPD技術(shù)進(jìn)行聚類分析，利用4個(gè)檢驗(yàn)指數(shù)對(duì)5個(gè)總體取樣比例進(jìn)行比較，從中選取最佳核心種質(zhì)。
　　 主要結(jié)論如下:
　　 1.據(jù)表型數(shù)據(jù)構(gòu)建菏澤地區(qū)牡丹核心種質(zhì)的最佳構(gòu)建方法為:按花型分組，組內(nèi)用多樣性指數(shù)法，類平均聚類取樣，總體取樣比例為15％。
　　 2.適用于牡丹的RAPD擴(kuò)增的最佳反應(yīng)體系為20uL反應(yīng)體系中，Mg2+濃度為2mmol

4、/L，DNTP濃度為0.15mmol/L，引物濃度為0.2mol/L，TaqDNA聚合酶1.5U，DNA為20-30ng。擴(kuò)增程序?yàn)?94℃預(yù)變性4min，94℃變性30s，38℃退火40s，72℃延伸1min，45個(gè)循環(huán)后，72℃延伸5min，12℃保存。
　　 3.10個(gè)S序列隨機(jī)引物共擴(kuò)增出181條帶，其中163條為多態(tài)性條帶。使用的10個(gè)隨機(jī)引物能將初級(jí)核心種質(zhì)的102個(gè)品種區(qū)分開(kāi)。
　　 4.菏澤地區(qū)牡丹核心種