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文檔簡介
1、通過觀察細胞周期和凋亡相關因子pRb和E2F-1的變化,探討褪黑素(melatonin,MLT)阻滯H22肝癌細胞周期、誘導細胞凋亡的機制,為臨床應用褪黑素預防和治療人類腫瘤提供理論依據(jù).在體外,H22細胞用含10％小牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng),并用1×10<'-9>mol/LT和1×10<'-6>mol/LMLT孵育,以四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法分析細胞活力,吖啶橙(acridine orange,AO)熒光染色觀察細胞的
2、形態(tài)學變化,碘化丙啶(PI)單染后,流式細胞術(shù)(flow cytometry,FCM)分析細胞周期時相分布及凋亡細胞比例,免疫組化SABC法檢測H22細胞pRb和E2F-1蛋白水平.動物實驗中,用H22細胞建立荷瘤動物模型,觀察兩種不同濃度(4mg/kg.d和0.04mg/kg.d)MLT對荷瘤動物的治療效果;免疫組化SABC法檢測MLT治療后移植瘤組織pRb和E2F-1蛋白水平.結(jié)果顯示用14mg/kg.d劑量MLT治療荷瘤動物,動物
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