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文檔簡介
1、目的:
本研究通過檢測MTA-2 mRNA和蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌(LSCC)組織中的表達(dá),分析MTA-2的表達(dá)與各臨床病理因素之間的關(guān)系及臨床意義,也為將來把MTA-2作為早期診斷喉癌的指標(biāo)之一打下基礎(chǔ),并為以后喉鱗狀細(xì)胞癌的基因治療提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。
方法:
實驗對象:收集90例喉鱗狀細(xì)胞癌石蠟標(biāo)本,其中40例為配對資料(原發(fā)灶與相應(yīng)的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶);另收集20例癌旁5mm以外的正常喉上皮組織作為對照。為了
2、驗證免疫組化的結(jié)果,我們收集30對喉鱗狀細(xì)胞癌與癌旁正常喉上皮組織的新鮮標(biāo)本(對應(yīng)標(biāo)記)提取其mRNA和蛋白。
采用免疫組化方法喉鱗狀細(xì)胞癌組織標(biāo)本中MTA-2的表達(dá),并確定MTA-2與患者的年齡和性別,以及喉鱗狀細(xì)胞癌分化程度、PTNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理因素的關(guān)系;并檢測MTA-2在原發(fā)灶與其相對應(yīng)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)差異。
利用RT-PCR和Western-blotting方法檢測30對喉鱗狀細(xì)胞癌與癌旁
3、正常喉上皮組織標(biāo)本中MTA-2的mRNA和蛋白表達(dá)情況,并統(tǒng)計分析驗證它們與臨床病理因素的相關(guān)性。
應(yīng)用SPSS for Windows13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用Pearson's Chi-Square檢驗分析MTA-2的表達(dá)與喉鱗癌患者臨床病理因素的關(guān)系;MTA-2在原發(fā)灶與LN轉(zhuǎn)移灶表達(dá)的比較采用 McNemar法、RT-PCR和Western Blotting結(jié)果采用Independent-Samples T檢驗分析
4、。P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)差異。
結(jié)果:
?。?)MTA-2在喉鱗狀細(xì)胞癌及癌旁喉上皮組織中的表達(dá):90例喉鱗狀細(xì)胞癌組織中,MTA-2陽性表達(dá)率高達(dá)64.4%(58/90),且均表達(dá)于癌細(xì)胞核內(nèi),而在20例相應(yīng)的癌旁喉上皮組織中MTA-2為陰性表達(dá)。
?。?)MTA-2在喉鱗狀細(xì)胞癌原發(fā)灶與配對的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá):MTA-2在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的陽性表達(dá)率為85%(34/40),明顯高于其配對的原發(fā)灶的62
5、.5%。
?。?)MTA-2 mRNA在喉鱗狀細(xì)胞癌及癌旁正常喉上皮組織中的表達(dá):喉鱗狀細(xì)胞癌組織中為0.99±0.08,癌旁正常喉上皮組織中為0.38±0.14。
(4)MTA-2蛋白量在喉鱗狀細(xì)胞癌及癌旁正常喉上皮組織中的表達(dá):喉鱗狀細(xì)胞癌組織中為0.92±0.23,癌旁正常喉上皮組織中為0.34±0.12。
(5)MTA2 mRNA和蛋白的表達(dá)與喉鱗狀細(xì)胞癌患者臨床病理特征的關(guān)系:MTA-2在低分化,高
6、分期和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)明顯增高,MTA-2的表達(dá)與喉癌臨床PTNM分期呈正相關(guān),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān),與癌腫瘤的分化程度呈負(fù)相關(guān),而與患者的性別差異,年齡大小無顯著關(guān)系。
結(jié)論:
?。?)MTA-2基因在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中呈高表達(dá),并且與喉癌臨床PTNM分期呈正相關(guān),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān),與癌腫瘤的分化程度呈負(fù)相關(guān),與患者的年齡、性別無明顯相關(guān)性。
?。?)MTA-2 mRNA和蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)水平
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