石柱參的生藥學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 1.石柱參是參類藥材的一種特殊品系，有著獨(dú)特的生長(zhǎng)環(huán)境及獨(dú)特的歷史文化，為參類藥材之珍品。本文擬通過(guò)形態(tài)學(xué)鑒別知識(shí)，對(duì)石柱參品系進(jìn)行研究，從宏觀與微觀等方面探討石柱參與普通園參的不同特點(diǎn)，為石柱參與其它參類藥材的鑒別提供科學(xué)參考，為石柱參的資源開(kāi)發(fā)與利用提供資料。
　　 2.石柱參生長(zhǎng)環(huán)境特殊、地理位置獨(dú)特、生長(zhǎng)年限久遠(yuǎn)，與普通園參除形態(tài)方面發(fā)生改變外，化學(xué)成分方面是否變化是本文研究和探討的另一個(gè)方面。本文

2、通過(guò)TLC和對(duì)9種人參皂苷的含量測(cè)定，尋找石柱參與其它參類藥材的特征性成分，為石柱參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供科學(xué)依據(jù)，為石柱參新的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供科學(xué)參考。
　　 3.建立石柱參HPLC指紋圖譜，為鑒別藥材真?zhèn)?、判斷藥材質(zhì)量的穩(wěn)定性及市場(chǎng)商品的質(zhì)量提供新的科學(xué)方法。
　　 材料與方法：
　　 1.材料：石柱參植物分類學(xué)上屬于五加科（Araliaceae）人參屬（Panax）植物人參Panax ginseng C.A

3、.Mey.干燥的根及根莖。采自遼寧省丹東市寬甸滿族自治縣振江鄉(xiāng)石柱子村，共采集樣品21批（見(jiàn)表1-1）。園參藥材為商品藥材。
　　 2.方法：（1）植物形態(tài)分類方法。（2）傳統(tǒng)形態(tài)鑒別方法。（3）組織形態(tài)學(xué)方法：應(yīng)用冰凍切片機(jī)制備組織切片，并進(jìn)行觀察、描述及數(shù)碼攝影。（4）TLC色譜分析方法。（5）高效液相色譜法測(cè)定9種人參皂苷的含量，并制定指紋圖譜。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過(guò)植物形態(tài)學(xué)和傳統(tǒng)形態(tài)鑒別方法，進(jìn)

4、一步明確了石柱參的品系分類：石柱參屬于野生山參類別，因其獨(dú)特的生長(zhǎng)環(huán)境和300年的栽培歷史，使其外形酷似野山參，石柱參的品系可分為4種：（1）竹節(jié)蘆；（2）線蘆；（3）圓膀圓蘆；（4）草廬。宏觀分類研究為石柱參與其它參類藥材的鑒別提供了科學(xué)參考。
　　 2.通過(guò)對(duì)不同生長(zhǎng)年限、不同部位石柱參的組織形態(tài)學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)了顯微特征與生長(zhǎng)年限的某些規(guī)律、與商品藥材園參的顯微特征的某些不同，同時(shí)對(duì)園參的顯微特征有了新的發(fā)現(xiàn)和認(rèn)識(shí)。（1）石柱

5、參的組織形態(tài)學(xué)方面，隨著石柱參生長(zhǎng)年限的延長(zhǎng)，其樹(shù)脂道和草酸鈣簇晶均呈現(xiàn)增多、增大趨勢(shì)；木質(zhì)部導(dǎo)管增多，由單個(gè)散在，變?yōu)橹饾u聚集并排列成放射狀。（2）商品石柱參與商品園參在組織形態(tài)上的區(qū)別主要體現(xiàn)在：樹(shù)脂道直徑大且多，草酸鈣簇晶、淀粉粒眾多，形成層特別明顯而且連續(xù)，這與其生長(zhǎng)年限長(zhǎng)有關(guān)。（3）石柱參粉末觀察結(jié)果：□樹(shù)脂道直徑大且碎片眾多，棕色塊多見(jiàn)，□草酸鈣簇晶棱角尖銳，數(shù)量多且大；□木薄壁細(xì)胞具有斜向交錯(cuò)的紋理，且清晰明顯；□淀粉粒多

6、且大。（4）關(guān)于園參藥材粉末特征的新認(rèn)識(shí)：通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)觀察，我們發(fā)現(xiàn)6年生以上的園參藥材粉末，其木薄壁細(xì)胞也具有斜向交錯(cuò)的紋理，這與以往的研究報(bào)道不同。
　　 3.通過(guò)石柱參與園參大量的TLC色譜鑒別比較，選用硅膠G-CMC板薄層板，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10）10□以下放置的下層溶液作為展開(kāi)劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)石柱參的薄層色譜在Rf=4.9位置增加一個(gè)斑點(diǎn)，為兩者的鑒定提供了有價(jià)值參考。
　　 4.

7、利用高效液相色譜法，對(duì)石柱參與園參中的9種人參皂苷（Rg1、Re、Rf、Rg2、Rb1、Re、Rb2、Rb3、Rd）進(jìn)行的含量測(cè)定結(jié)果：其中人參皂苷Rb1含量較高，明顯高于其他8種人參皂苷，其次是人參皂苷Rg1、Re、Rc的含量較高。9種人參皂苷中Rg2的含量較低。
　　 5.利用高效液相色譜法建立了石柱參藥材的指紋圖譜，共標(biāo)定了14個(gè)共有峰，其中9個(gè)共有峰得到歸屬。由于S峰（人參皂苷Re）的分離度好，含量高，專屬性強(qiáng)，比較穩(wěn)定

8、，故確定其為參照峰。采用國(guó)家藥典委員會(huì)推薦的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004版》軟件，對(duì)圖譜進(jìn)行匹配，進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。14個(gè)共有峰的峰面積之和占總峰面積的90％以上，符合中藥材指紋圖譜技術(shù)要求。且譜峰特征明顯清晰，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，實(shí)驗(yàn)條件及方法準(zhǔn)確、可行。通過(guò)石柱參藥材指紋圖譜能有效地控制石柱參的質(zhì)量，為該藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定及石柱參的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)與參考。
　　 結(jié)論：
　　 1.石柱參也稱林下石柱參，是源于野

9、山參的珍稀人參品種，是參類藥材的佳品，對(duì)石柱參品系的深入研究，并與商品園參的比較研究，對(duì)開(kāi)發(fā)該參類品系具有非常重要的意義和研究?jī)r(jià)值。
　　 2.石柱參獨(dú)特的生長(zhǎng)環(huán)境及獨(dú)特的歷史文化，使其形態(tài)與眾不同，本文通過(guò)形態(tài)學(xué)鑒別知識(shí)，對(duì)石柱參品系進(jìn)行了觀察比較。為石柱參與其它參類藥材的鑒別提供科學(xué)參考，為石柱參的資源開(kāi)發(fā)與利用提供資料。
　　 3.通過(guò)微觀鑒定研究，尋找到了石柱參與園參粉末鑒定區(qū)別點(diǎn)，探尋出了石柱參不同生長(zhǎng)年限及隨

10、生長(zhǎng)年限的增長(zhǎng)，組織構(gòu)造的發(fā)生規(guī)律；同時(shí)對(duì)園參的顯微特征有了新的認(rèn)識(shí)，發(fā)現(xiàn)新的組織，對(duì)以往報(bào)道的園參粉末特征木薄壁細(xì)胞未見(jiàn)斜向交錯(cuò)紋理的觀點(diǎn)提出商榷。
　　 4.首次采用薄層色譜法對(duì)石柱參藥材進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)了薄層板上與園參不同的色譜斑點(diǎn)，有可能作為石柱參與園參的鑒別標(biāo)志，但還需進(jìn)行更深一步的研究，對(duì)該成分進(jìn)行化學(xué)成分分析，藥效學(xué)的研究等。
　　 5.首次測(cè)定了石柱參中9種人參皂苷的含量，并建立了同時(shí)測(cè)定9種人參皂苷含量的

11、方法，該方法穩(wěn)定可靠，簡(jiǎn)單易行，快速準(zhǔn)確，可為石柱參的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考，同時(shí)也可用于參類藥材各人參皂苷的定量分析。含量測(cè)定的結(jié)果顯示，石柱參中人參皂苷含量隨生長(zhǎng)年限的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，15年生石柱參人參皂苷含量最高，商品藥材石柱參優(yōu)于園參，石柱參的最佳采收期為8月上旬。對(duì)石柱參的含量測(cè)定研究，為正確認(rèn)識(shí)和使用石柱參藥材提供了科學(xué)的參考依據(jù)。
　　 6.首次對(duì)石柱參藥材進(jìn)行了指紋圖譜研究，確立了石柱參的指紋特征圖譜，且圖譜峰特征明顯清晰