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1、近幾年來,國內(nèi)外已經(jīng)建立起一種利用致病毒素或毒素類似物結(jié)合組織培養(yǎng)技術(shù)離體篩選抗病突變體的新方法。本實驗旨在通過研究大蒜紫斑病病菌的生物學(xué)特性及其病原菌產(chǎn)生粗毒素的條件,為以后利用大蒜紫斑病病原菌粗毒素,篩選具穩(wěn)定遺傳性的大蒜抗紫斑病細(xì)胞變異系奠定基礎(chǔ)。 試驗從田間具有典型病斑的發(fā)病大蒜葉片上分離病菌并鑒定培養(yǎng),形態(tài)和致病性鑒定結(jié)果表明,分生孢子梗直或向一側(cè)略彎曲,褐色,分生孢子常單生或簇生,倒棍棒狀、長橢圓形,具橫膜5~15個
2、,縱隔膜1~6個,喙部(嘴胞)直或彎曲,具隔膜0~7個。與Alternaria屬相關(guān)的文獻(xiàn)資料對照,將其鑒定為Alternaria porri(Elliott)Cif(蔥鏈格孢)。 生物學(xué)測定結(jié)果表明,供試的5種培養(yǎng)基:胡蘿卜蔥汁蔗糖培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯胡蘿卜蔗糖瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯蔥汁瓊脂培養(yǎng)基、胡蘿卜蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中,病菌在馬鈴薯蔥汁瓊脂培養(yǎng)基上生長速率最快,產(chǎn)孢量也最多;菌絲生長的適宜溫度范圍為22~30℃
3、,低于18℃或者高于37℃均不適宜生長,菌絲培養(yǎng)的最適溫度為26℃;病菌產(chǎn)孢的適宜溫度范圍為20~26℃,產(chǎn)孢培養(yǎng)的最適溫度為22℃。菌絲在光暗交替條件下生長最快,在連續(xù)黑暗條件下產(chǎn)孢最多;在pH值5~12范圍內(nèi)均能生長和產(chǎn)孢,以pH 8產(chǎn)孢最多。 針對大蒜體細(xì)胞抗病變異篩選育種中需要的病菌毒素,實驗研究了產(chǎn)生粗毒素的培養(yǎng)條件。結(jié)果表明,在試驗設(shè)計的4種產(chǎn)毒培養(yǎng)基:改良Fries培養(yǎng)基、PSK培養(yǎng)基、查彼克培養(yǎng)基、改良理查德培養(yǎng)
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