大鼠動(dòng)脈瘤模型水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞治療的相關(guān)研究.pdf

1、第一部分:大鼠動(dòng)脈瘤水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞的體內(nèi)研究
　　目的:HELPS臨床試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，與裸鉑金彈簧圈栓塞相比，用水凝膠彈簧圈HydroCoil栓塞系統(tǒng)治療腦動(dòng)脈瘤時(shí)患者的復(fù)發(fā)率明顯降低了8.6％。在本實(shí)驗(yàn)中，我們分別將裸鉑金彈簧圈和水凝膠彈簧圈HydroCoil植入大鼠動(dòng)脈瘤模型中，旨在研究HydroCoil栓塞后的動(dòng)脈瘤腔病理變化及其優(yōu)于裸鉑金彈簧圈的可能機(jī)制。
　　材料與方法:制備大鼠頸外動(dòng)脈盲袋動(dòng)

2、脈瘤模型，將長(zhǎng)度為5mm的裸鉑金彈簧圈和水凝膠彈簧圈HydroCoil分別植入動(dòng)脈瘤處，對(duì)照組除了未植入彈簧圈外，其余操作均同彈簧圈植入治療組。彈簧圈植入后14天，過(guò)量麻醉處死大鼠，將整個(gè)頸總動(dòng)脈分叉部連同動(dòng)脈瘤一起取出。動(dòng)脈瘤腔連同周圍血管組織固定染色后行組織病理學(xué)檢測(cè)。ImageJ軟件勾畫(huà)并計(jì)算機(jī)化面積占管腔面積的百分比和剩余內(nèi)膜彈力層的百分比，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:彈簧圈植入大鼠動(dòng)脈瘤14天后可以觀察到，水凝膠彈簧圈Hy

3、droCoil植入治療組，ECA瘤腔處的機(jī)化組織面積百分比明顯高于裸鉑金彈簧圈植入組(60.42±22.58％ vs.15.62±19.24％;P=.01)和對(duì)照組(60.42±22.58％ vs.4.61±3.86％，P=.002)。水凝膠彈簧圈HydrogelCoil植入大鼠ECA盲袋動(dòng)脈瘤治療14天后，ECA瘤腔剩余彈力層的百分比遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對(duì)照組和裸鉑金彈簧圈治療組，分別為21.67±16.50％ vs.100％和96.06±8.7

4、8％;P＜0.001。而機(jī)化組織面積百分比和剩余彈力層的百分比在對(duì)照組和裸鉑金彈簧圈植入治療組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)差異。
　　結(jié)論:在大鼠ECA盲袋動(dòng)脈瘤模型上，水凝膠彈簧圈HydroCoil能夠引起明顯的動(dòng)脈瘤壁組織增生機(jī)化和修復(fù)，而并非裸鉑金彈簧圈引起的瘤腔內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化，這可能是由于HydroCoil能引起更多的血管內(nèi)皮和彈力層的破壞以及平滑肌細(xì)胞的增生所致。
　　第二部分:血管內(nèi)皮細(xì)胞在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的

5、生長(zhǎng)增值
　　目的:在第一部分實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)大鼠ECA盲袋動(dòng)脈瘤模型觀察到，水凝膠彈簧圈HydroCoil能引起動(dòng)脈瘤壁的血管內(nèi)皮和彈力層的破壞以及平滑肌細(xì)胞的增生。本實(shí)驗(yàn)中我們將血管內(nèi)皮細(xì)胞接種在兩種彈簧圈進(jìn)行培養(yǎng)，比較血管內(nèi)皮細(xì)胞在兩種彈簧圈上生長(zhǎng)增殖情況的差別，分析兩種彈簧圈在大鼠動(dòng)脈瘤模型中引起不同組織反應(yīng)的可能機(jī)制。
　　材料與方法:將小鼠的腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系bEnd3培養(yǎng)后分別接種子水凝膠彈簧圈HydroCoil和裸

6、鉑金彈簧圈上，在不同的時(shí)間點(diǎn)（第0、1、3、7、14和21天）將彈簧圈上生長(zhǎng)的細(xì)胞用胰蛋白酶洗脫下來(lái)進(jìn)行計(jì)數(shù)，描述血管內(nèi)皮細(xì)胞在彈簧圈上的生長(zhǎng)曲線，并進(jìn)行細(xì)胞的Live/Dead和PECAM-1熒光染色。
　　結(jié)果:腦血管內(nèi)皮細(xì)胞bEnd3在水凝膠彈簧圈HydroCoil上生長(zhǎng)3天就達(dá)到高峰，但是3天后細(xì)胞明顯凋亡，而在裸鉑金彈簧圈上生長(zhǎng)到第14天才到達(dá)高峰，而且高峰細(xì)胞數(shù)量也不及HydroCoil。Live/Dead細(xì)胞染色顯示

7、在裸鉑金彈簧圈上，細(xì)胞死亡后部分會(huì)粘附在彈簧圖表面，而在水凝膠彈簧圈HydroCoil上則沒(méi)有。水凝膠彈簧圈HydroCoil上的內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)PECAM-1較裸鉑金彈簧圈上的明顯弱。
　　結(jié)論:血管內(nèi)皮細(xì)胞在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的生長(zhǎng)增殖較裸鉑金彈簧圈迅速且顯著，但是凋亡也較快;而且在水凝膠彈簧圈HydroCoil上的血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附能力較裸鉑金彈簧圈差。
　　第三部分:抗血小板藥對(duì)大鼠動(dòng)脈瘤模型彈簧圈栓塞后動(dòng)脈

8、瘤血栓化的影響
　　目的:支架輔助下的彈簧圈栓塞使顱內(nèi)巨大動(dòng)脈瘤、寬頸動(dòng)脈瘤和梭形動(dòng)脈瘤均能進(jìn)行血管內(nèi)介入治療，但是其主要缺點(diǎn)是血栓形成。支架輔助動(dòng)脈瘤栓塞術(shù)后抗血小板治療已經(jīng)被廣泛接受，但是口服抗血小板藥物在防止載瘤動(dòng)脈血栓形成的同時(shí)是否會(huì)延遲動(dòng)脈瘤內(nèi)血栓形成，目前尚無(wú)相關(guān)研究。本實(shí)驗(yàn)利用大鼠ECA盲袋動(dòng)脈瘤彈簧圈栓塞模型，研究目前臨床上常用的抗血小板藥物對(duì)彈簧圈栓塞后短期內(nèi)動(dòng)脈瘤內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化的影響。
　　材料與方

9、法:將30只大鼠隨機(jī)分為6組，每組5只。3組為裸鉑金彈簧圈植入組:阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥（阿司匹林+氯吡格雷）組。另3組為水凝膠彈簧圈HydroCoil植入組:阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥組。裸鉑金彈簧圈植入組和HydroCoil植入組分別用本實(shí)驗(yàn)研究的第一部分中的數(shù)據(jù)作為各自的對(duì)照。給藥劑量為阿司匹林200mg/Kg，氯吡格雷75mg/Kg，聯(lián)合用藥是200mg/Kg阿司匹林+75mg/Kg氯吡格雷同時(shí)給予。給藥時(shí)間為手

10、術(shù)前1h給藥1次，手術(shù)后第1天開(kāi)始每天給藥1次，直到第14天處死。給藥途徑為將藥物碾碎后按照大鼠體重稱取相應(yīng)重量的藥物，將其溶于1-2ml大鼠飲用水中制成混懸液，通過(guò)灌胃給藥。利用大鼠ECA盲袋動(dòng)脈瘤模型，彈簧圈植入14天后，過(guò)量麻醉處死大鼠，將整個(gè)頸總動(dòng)脈分叉連同動(dòng)脈瘤一起取出。動(dòng)脈瘤腔連同周圍血管組織固定染色后行組織病理學(xué)檢測(cè)，計(jì)算機(jī)化面積占管腔面積的百分比并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:大鼠動(dòng)脈瘤模型植入裸鉑金彈簧圈后14天，

11、動(dòng)脈瘤腔血栓形成和組織機(jī)化所占瘤腔的百分比在對(duì)照組、阿司匹林組、氯吡格雷組和聯(lián)合用藥組分別為15.62±19.24％ vs.13.62±5.22％ vs.8.20±9.23％ vs.24.46±23.90％，各組間比較均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。水凝膠彈簧圈HydroCoil植入后14天，動(dòng)脈瘤內(nèi)血栓形成和組織機(jī)化所占瘤腔的百分比在各組分別為60.42±22.58％ vs.48.95±7.43％ vs.46.73±16.12％ vs.49.01