兩個(gè)心臟系統(tǒng)疾病家系的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、肢帶型肌營(yíng)養(yǎng)不良(limbgirdlemusculardystrophies,LGMD)是一組遺傳異質(zhì)性肌源性疾病,主要表現(xiàn)為四肢對(duì)稱性的近端肌肉進(jìn)行性無(wú)力萎縮。根據(jù)該病的遺傳方式不同,?？煞譃槌Ｈ旧w顯性遺傳(LGMD1型)和常染色體隱形遺傳(LGMD2型)[1],由于不同基因的缺陷,每型又分為許多亞型?，F(xiàn)1型有8個(gè)亞型(1A-1H),其致病基因已被確定,2型有16個(gè)亞型(2A-2P),其2A-2K致病基因和蛋白產(chǎn)物已被明確[3]。其

2、他形式的致病編碼基因現(xiàn)還是一個(gè)未知數(shù),仍在探索之中。針對(duì)本研究家系的臨床特點(diǎn)和病理研究表現(xiàn),初步診斷為L(zhǎng)GMD1B型。
　　肢帶型肌營(yíng)養(yǎng)不良1B(LGMD1B)是一種罕見的常染色體顯性遺傳病,主要表現(xiàn)為進(jìn)行性的骨盆帶和肩帶肌肉萎縮,以對(duì)稱性下肢近端進(jìn)行性肌肉萎縮開始,逐漸影響到上肢肌肉萎縮,伴有心臟傳導(dǎo)障礙的擴(kuò)張型心肌病導(dǎo)致心律失常甚至心臟猝死[10]。LGMD1B與位于1q21上的核纖層蛋白LaminA/C編碼基因突變相關(guān),臨床

3、資料和基因診斷是對(duì)心臟病治療和遺傳咨詢至關(guān)重要的作用。
　　遺傳性脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)(spinocerebellarataxias,SCAs),是一類具有高度的臨床異質(zhì)性和遺傳異質(zhì)性的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,多為常染色體顯性遺傳(ADSCAs),也有常染色體隱性遺傳(SCARs)和X連鎖隱性遺傳(SCAXs)。該病主要累及脊髓、小腦和腦干,臨床表現(xiàn)為小腦性共濟(jì)失調(diào),伴有構(gòu)音障礙、吞咽困難等復(fù)雜的錐體系及錐體外系癥狀。目前已經(jīng)定位了33

4、個(gè)SCA亞型的染色體位置,克隆了21個(gè)SCA亞型的致病基因,其中與動(dòng)態(tài)突變有關(guān)的亞型主要有SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA7、SCA17(編碼區(qū)CAG擴(kuò)增),SCA8(5'UTR的CTG擴(kuò)增),SCA12(5'UTR的CAG擴(kuò)增),SCA10(內(nèi)含子ATTCT擴(kuò)增),SCA31(內(nèi)含子TGGAA擴(kuò)增)和SCA36(內(nèi)含子GGCCTG擴(kuò)增)[21]。
　　先天性房間隔缺損(atrialseptaldefect,ASD)

5、是指心房在發(fā)育過(guò)程中房間隔吸收和融合出現(xiàn)異常,左右心房之間殘留未關(guān)閉的房間隔,是先心病中最常見的病變。房缺可單獨(dú)存在,也可與其他心血管畸形合并存在,絕大部分由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用引起,但也有單基因遺傳的房缺家系。
　　這次研究主要對(duì)來(lái)自西南地區(qū)的1例LGMD和1例SCA伴房間隔缺損先證者進(jìn)行家系的調(diào)查并收集相關(guān)的臨床資料,分別對(duì)其進(jìn)行基因診斷和突變篩查,不僅對(duì)患者確認(rèn)了診斷,還可以確認(rèn)或者排除家系中其他的癥狀,更細(xì)化了基因突

6、變圖譜,對(duì)家系成員的生育指導(dǎo)、疾病控制也有重要意義。
　　第二章:房室傳導(dǎo)阻滯一家系的遺傳學(xué)研究
　　研究方法:
　　對(duì)1例先證者進(jìn)行了家系調(diào)查和臨床資料的相關(guān)收集,采集包括先證者在內(nèi)的8名家系成員以及100名健康對(duì)照者的靜脈血標(biāo)本并提取了基因組DNA。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和直接測(cè)序的方法對(duì)收集到的家系成員分別進(jìn)行肢帶型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥相關(guān)致病基因進(jìn)行突變檢測(cè)和共分離分析。
　　研究結(jié)果:
　　1.該家系為常染色

7、體顯性遺傳模式,先證者臨床表現(xiàn)為對(duì)稱性四肢肌肉無(wú)力,活動(dòng)后胸悶、心悸等癥。家族史呈陽(yáng)性。
　　2.在家系患者中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的LMNA基因第9號(hào)外顯子22514位核苷酸出現(xiàn)T>C的突變(c.1558TC),該突變導(dǎo)致LMNA基因編碼蛋白的第520位氨基酸由色氨酸變?yōu)榫彼?Trp520Arg),其突變位點(diǎn)為本研究首次發(fā)現(xiàn)。家系的正常成員及選取的健康對(duì)照中均未發(fā)現(xiàn)該突變位點(diǎn)。
　　3.結(jié)合家族史、臨床表現(xiàn)、常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的檢查和致病

8、基因LGMD1B突變檢測(cè),本研究的先證者及患病的家系成員可明確診斷為L(zhǎng)GMD1B.篩選無(wú)癥狀家庭成員散發(fā)病例。
　　第三章:脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)合并房間隔缺損一家系的遺傳學(xué)
　　研究方法:
　　對(duì)4代SCA家系分別對(duì)脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)和房間隔缺損兩個(gè)疾病表型進(jìn)行臨床診斷、家系調(diào)查和系譜分析,收集相關(guān)臨床資料及采集靜脈血標(biāo)本,通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和直接測(cè)序的方法對(duì)收集到的家系成員分別進(jìn)行脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)和房間隔缺損相關(guān)致病基因

9、進(jìn)行突變檢測(cè)和共分離分析。
　　研究結(jié)果:
　　1.該家系4代共有脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)現(xiàn)癥和已故共15名,呈常染色體顯性遺傳模式,病史回顧示家系患者均無(wú)明確誘因出現(xiàn)行走不穩(wěn)、飲水嗆咳、言語(yǔ)不清等共濟(jì)失調(diào)的臨床特征。基因診斷發(fā)現(xiàn)該家系患者SCA3致病基因CAG異常擴(kuò)增。
　　2.在家系中還發(fā)現(xiàn)包括先證者在內(nèi)的5名先天性房缺患者,對(duì)房缺相關(guān)基因進(jìn)行突變篩查發(fā)現(xiàn)3名房缺患者均攜帶有MYH6基因編碼區(qū)的一個(gè)錯(cuò)義突變c.1154C>