四倍體太平洋牡蠣繁殖生物學(xué)初探.pdf

1、本文以人工誘導(dǎo)培育的四倍體太平洋牡蠣為研究對象，通過對其懷卵量、卵子大小、性比及胚胎發(fā)育、離體精子的存活能力等方面與對照組二倍體牡蠣的比較，探討四倍體太平洋牡蠣的繁殖生物學(xué)基礎(chǔ)；通過四倍體的自群繁育，建立了穩(wěn)定的太平洋牡蠣四倍體群體；通過四倍體太平洋牡蠣(♂)×二倍體太平洋牡蠣(♀)精子入卵過程的掃描電鏡觀察，肯定了四倍體與二倍體牡蠣雜交培育全三倍體的可行性，為多倍體育種理論提供了重要的實驗與實踐依據(jù)。 研究結(jié)果主要分為以下四個

2、部分： 1、四倍體太平洋牡蠣(C.gias Thuberg)繁殖習(xí)性研究 在山東青島嶗山和海陽兩地，對四倍體太平洋牡蠣(C.gigas)的懷卵量、卵徑、性比以及胚胎發(fā)育等繁殖習(xí)性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，殼長3～5cm的四倍體太平洋牡蠣的懷卵量為1.87～67.2萬粒(平均為35.73萬粒)；多倍體牡蠣能產(chǎn)生較大的卵子，4n卵徑平均64.68μm，比3n(55.72μm)增大14.29％，比2n(51.28μm)增大31.

3、06％。在l齡四倍體群體中發(fā)現(xiàn)24個雄體和1個雌體，雌雄性比為1：24，2齡四倍體親貝中雌性比例為38.46％，雄性為53.85％，雌雄同體占7.69％。四倍體牡蠣在23℃約12min即出現(xiàn)第一極體，比對照組稍快，但差異不顯著，從胚胎發(fā)育速度看四倍體太平洋牡蠣與三倍體、二倍體之間沒有區(qū)別。 2、四倍體與二倍體太平洋牡蠣(C.gigas Thunberg)離體精子的存活能力比較 本研究在不同溫度和不同濃度條件下對四倍體(

4、4n)與二倍體(2n)太平洋牡蠣離體精子的存活能力進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，四倍體與二倍體太平洋牡蠣的精子的存活時間均隨溫度的升高和濃度的降低而縮短，四倍體牡蠣的精子的存活能力低于二倍體。四倍體牡蠣的精子在10℃可存活8h，在28℃僅2h；二倍體牡蠣的精子在10℃可存活12h，在28℃僅4h。四倍體牡蠣的精子在較高濃度(6.4×10<'7>／ml)下可存活8h，較低濃度(2.0×10<'6>／ml)下低于1h；二倍體牡蠣的精子存活時間分別超

5、過10h和lh。 3、四倍體太平洋牡蠣(C.gigas Thunberg)自群繁殖的研究 利用誘導(dǎo)的1齡四倍體太平洋牡蠣做親貝,通過解剖取卵、人工受精的方法進(jìn)行四倍體牡蠣的自群繁殖。結(jié)果表明四倍體太平洋牡蠣自群繁殖的受精率為95.54[％],孵化率為37.38[％],采用同一雌體四倍體牡蠣與二倍體雄貝雜交產(chǎn)生的三倍體組(TD)的受精率為85.19[％],而以二倍體做母本、四倍體做父本的雜交組(DT)的受精率為98.73

6、[％],二倍體對照組的受精率為96.39[％]。四倍體牡蠣經(jīng)自群繁殖培育出稚貝1130粒。經(jīng)流式細(xì)胞儀分析,四倍體太平洋牡蠣幼蟲和稚貝的四倍體率均達(dá)到100[％]。幼蟲培育過程中,從孵化出D型幼蟲到出現(xiàn)眼點,幼蟲的成活率達(dá)11.86[％], 眼點幼蟲的變態(tài)率高達(dá)16.1[％]。在受精24h后,采用流式細(xì)胞儀檢測D形幼蟲的倍率,二倍體對照組產(chǎn)生一個單獨的2n峰,雜交組DT與TD組則形成一個單獨的3n峰,TT組形成1個完整的4n峰。在生長到

7、1齡的成貝中檢測結(jié)果DD的二倍體率為100[％],DT組的三倍體率為98.5[％],TT組的四倍體率為77.45[％]。實驗證明四倍體太平洋牡蠣可以進(jìn)行自群繁殖,能夠形成穩(wěn)定的群體。 4、四倍體太平洋牡蠣(♂)×二倍體太平洋牡蠣(♀)精子入卵過程及其精子的掃描電鏡觀察 采用掃描電鏡對四倍體太平洋牡蠣的精子和二倍體太平洋牡蠣的精子在超微結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了比較,四倍體太平洋牡蠣的精子從掃描電鏡觀察結(jié)果來看與二倍體牡蠣的精子在超微