紅汁乳菇生物學(xué)特性與半人工栽培技術(shù)研究.pdf

1、本項(xiàng)研究通過(guò)野外生態(tài)因子調(diào)查，菌根、菌絲、孢子、子實(shí)體等形態(tài)顯微觀察、DNA中內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)及大亞基(LSU)序列分析的探索，較系統(tǒng)地研究了其生物學(xué)特性，成功栽培出了紅汁乳菇子實(shí)體。設(shè)計(jì)驗(yàn)證了用于擴(kuò)展紅汁乳菇子實(shí)體和菌根等DNA的特異引物，對(duì)紅汁乳菇適生土壤化學(xué)營(yíng)養(yǎng)和物理結(jié)構(gòu)進(jìn)行了測(cè)定分析，為紅汁乳菇種植園的建立與管理提供了依據(jù)。首次報(bào)道紅汁乳菇-馬尾松菌根的菌絲套網(wǎng)格結(jié)構(gòu)特征，確認(rèn)紅汁乳菇菌絲細(xì)胞聯(lián)接處無(wú)鎖狀聯(lián)合；對(duì)紅汁乳菇

2、秋季產(chǎn)菇期間氣象條件的研究表明，較大幅度的降溫和降雨對(duì)誘發(fā)紅汁乳菇子實(shí)體形成是必需的。特別是對(duì)紅汁乳菇栽培區(qū)水分管理的研究，為保障紅汁乳菇干旱年份高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)提供了范例。其主要研究結(jié)果如下： 1.對(duì)菌根內(nèi)部結(jié)構(gòu)測(cè)定顯示，菌絲直徑、菌絲套厚度、哈蒂氏網(wǎng)厚度、菌根直徑的比例為1：4.7：31.9：138.4。首次報(bào)道了菌絲套的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)。菌絲套網(wǎng)格中網(wǎng)孔大多呈菱形，少數(shù)為不規(guī)則四邊形。測(cè)量結(jié)果表明，網(wǎng)孔長(zhǎng)度為寬度的2.85倍，網(wǎng)脊寬度為網(wǎng)

3、孔寬度的16.7﹪。確證紅汁乳菇菌絲細(xì)胞與細(xì)胞連接處沒(méi)有鎖狀聯(lián)合。 2.對(duì)多種乳菇屬真菌的ITS序列和LSU序列系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的研究表明，紅汁乳菇與L.akahatsu及L.sp聚成一群，但又彼此獨(dú)立成枝，說(shuō)明它們是親緣關(guān)系較密切的獨(dú)立的種。 無(wú)論是ITS序列還是LSU序列構(gòu)造的發(fā)育樹均證明L.hatsutake各菌株之間存在一定的變異。從ITS序列看，二者主要是在ITS2區(qū)的某些位點(diǎn)上存在堿基缺失、替代、顛換現(xiàn)象，有差異

4、的堿基達(dá)3-15個(gè)。 3.設(shè)計(jì)的紅汁乳菇特異引物對(duì)Primerhat1F(AAAGGCCTCCAAAGTCCAAG)和PrimerhatlR(TCGTACCAGGTTTCCGTAGG)在設(shè)定條件下擴(kuò)增多種真菌DNAITS序列的電泳顯帶結(jié)果表明，該引物對(duì)僅能擴(kuò)增紅汁乳菇子實(shí)體及紅汁乳菇與馬尾松形成的菌根以及松乳菇的ITS序列，不能擴(kuò)增其它種及馬尾松的相應(yīng)區(qū)段的序列。說(shuō)明該對(duì)引物可用于紅汁乳菇及其菌根之DNA的種類識(shí)別。 4

5、.對(duì)湖南紅汁乳菇-馬尾松高產(chǎn)林分土壤物理化學(xué)性質(zhì)研究結(jié)果表明，紅汁乳菇適生土壤包括紅壤、黃壤和紫色土。主要由板巖、石灰?guī)r、紫色砂巖、第四紀(jì)紅色粘土母質(zhì)等發(fā)育而成。pH值范圍4.6-6.1，平均5.0。 紅汁乳菇適生土壤石礫含量可達(dá)18.7-47.11﹪，土壤容重為1.2-1.57，板巖的非毛管孔隙占總孔隙之比為29.54-36.69﹪，與其它母巖發(fā)育的土壤相比，土壤通氣性、透水性和持水能力的協(xié)調(diào)性較好。因此，對(duì)于紅汁乳菇栽培而言

6、，板巖發(fā)育的土壤是較理想的。 5.對(duì)紅汁乳菇產(chǎn)菇季節(jié)氣象條件的研究表明，開始產(chǎn)菇前，有大幅度的降溫和較多降雨，降溫幅度達(dá)10-12.3℃。在此期間，最高氣溫一般在20°C以下，最低氣溫9.5-15.9℃。而地溫一般為11-19℃。降雨呈間歇性交疊型，平均每天6.5-7.5mm。氣溫12-16°C，相對(duì)濕度80﹪是出菇的良好氣象條件。 6.紅汁乳菇菌絲可以在多種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在20-23℃條件下，6-8天長(zhǎng)出菌絲。菌絲初期

7、呈白色，后變淺黃、淺紅。將紅汁乳菇液體培養(yǎng)的菌絲接種到馬尾松無(wú)菌苗上，形成了紅汁乳菇菌根苗，繼續(xù)栽培到紫色砂巖發(fā)育的荒地上，成功培養(yǎng)出了紅汁乳菇子實(shí)體。 7.首次報(bào)道，連續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間的干旱(60天)，可以導(dǎo)致紅汁乳菇菌根死亡。表層土壤內(nèi)(0-30cm)，紅汁乳菇菌根死亡率可達(dá)85.8-92.76﹪。因此，適時(shí)采取抗旱措施，對(duì)于確保菌根存活與正常發(fā)育是非常必要的。 紅汁乳菇栽培試驗(yàn)地灌水試驗(yàn)表明，干旱季節(jié)進(jìn)行澆灌，可使產(chǎn)量提