南瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性與多糖多樣性的研究.pdf

1、南瓜是十分重要的瓜類(lèi)蔬菜作物，因其栽培簡(jiǎn)單，產(chǎn)量高，易于貯運(yùn)，而且營(yíng)養(yǎng)豐富，深受人們的喜愛(ài)。本研究以本實(shí)驗(yàn)室近年來(lái)收集的70份南瓜資源為研究對(duì)象，從形態(tài)性狀與分子水平上分析了這些資源的遺傳多樣性，有利于對(duì)這些種質(zhì)資源的收集、保存、鑒定、創(chuàng)新和有效利用。同時(shí)以功能型南瓜品種的選育為最終目的，首次對(duì)不同品種南瓜種質(zhì)資源從提取、分離純化、生物活性的研究等多方面展開(kāi)對(duì)南瓜重要的生物活性物質(zhì)--多糖的探討性研究，以探明高活性南瓜多糖的資源條件，為

2、保健品質(zhì)育種材料的選擇、選配以及功能性南瓜的選育提供一定的理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容主要如下： 1.對(duì)70份南瓜種質(zhì)45個(gè)植物學(xué)性狀進(jìn)行鑒定和分析，平均變異系數(shù)為32.16％，平均多樣性信息指數(shù)為1.25。基于形態(tài)數(shù)據(jù)的聚類(lèi)分析，70份南瓜種質(zhì)被分為三大類(lèi)群--中國(guó)南瓜、美洲南瓜、印度南瓜。主成分分析表明，前三個(gè)主成分的累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為67.31％，利用形態(tài)性狀對(duì)南瓜分類(lèi)時(shí)，首先應(yīng)考慮的是種子、瓜梗和花的特征，其次是根據(jù)植株的生長(zhǎng)習(xí)性分

3、類(lèi)，然后是根據(jù)瓜的形狀進(jìn)行分類(lèi)。 2.從100個(gè)引物中篩選出21個(gè)隨機(jī)引物，對(duì)70份南瓜種質(zhì)進(jìn)行了RAPD分析，共擴(kuò)增出168條帶，其中156條表現(xiàn)多態(tài)性，占總數(shù)的92.9％。平均每個(gè)引物產(chǎn)生7.43條多態(tài)帶?；赗APD標(biāo)記的聚類(lèi)分析，將70份南瓜種質(zhì)劃分為了三大類(lèi)。同時(shí)在三大類(lèi)群內(nèi)，又將種質(zhì)進(jìn)行了細(xì)分，第一類(lèi)分為了三組，第二類(lèi)分為了六組，第三類(lèi)分為了五組，其結(jié)果與地域來(lái)源和形態(tài)特征有一定的相關(guān)性。主坐標(biāo)分析與系統(tǒng)聚類(lèi)分析結(jié)果

4、基本一致。 3.對(duì)植物學(xué)性狀和RAPD兩種標(biāo)記問(wèn)的相似系數(shù)矩陣的相關(guān)性進(jìn)行Mantel檢驗(yàn)，得出形態(tài)標(biāo)記與分子標(biāo)記的相關(guān)系數(shù)為 0.6306；將植物學(xué)性狀和RAPD標(biāo)記的聚類(lèi)結(jié)果，按CONSEN程序中進(jìn)行作圖，獲得兩種聚類(lèi)結(jié)果的一致樹(shù)圖。表明形態(tài)標(biāo)記與分子標(biāo)記聚類(lèi)結(jié)果存在著一定程度的一致性，也存在差異，應(yīng)結(jié)合使用。 4.研究了南瓜多糖的熱水提取工藝和微波輔助提取工藝，對(duì)其工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，得出水提法提取南瓜多糖的過(guò)程中

5、，料液比是影響多糖提取率的最關(guān)鍵因素，南瓜多糖提取的最佳工藝條件是以1：40的料液比，在70℃水浴條件下，提取3次，每次提4h。而在微波提取工藝中，影響多糖提取率各因素的主次關(guān)系為：微波強(qiáng)度>微波時(shí)間>料液比，微波提取法最適工藝條件為：微波強(qiáng)度60％，微波時(shí)間20min，料液比1：30。通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)證明，不同方法提取的南瓜多糖均具有一定的抗氧化活性，微波工藝對(duì)南瓜多糖的體外抗氧化活性在超氧陰離子自由基(O<,2><'->)清除能力

6、上有微弱的下降趨勢(shì)。微波工藝在南瓜多糖提取上的有一定的應(yīng)用前景。 5.研究了南瓜多糖體外清除自由基以及抗氧化的作用。結(jié)果表明南瓜多糖可以清除·OH、O<,2><'->，抑制·OH 所致丙二醛的產(chǎn)生，減少·OH 所致紅細(xì)胞溶血，減輕·OH所致肝線粒體腫脹程度。 6.本文首次對(duì)56個(gè)不同品種南瓜多糖的提取率、含量，多糖中中性糖、糖醛酸含量及其體外抗氧化活性進(jìn)行了分析，不同南瓜品種的多糖的各個(gè)指標(biāo)含量的變幅和變異系數(shù)較大，表明

7、南瓜多糖特性和生物活性存在品種的多樣性。主成分分析將56份南瓜種質(zhì)按多糖含糖量和清除自由基能力的強(qiáng)弱分為了四組，第四組的三份種質(zhì)46 (02-4)、38 (H34)、5 (H13-3)多糖含量及多糖清除自由基的能力均較強(qiáng)，在保健品質(zhì)育種上比較有應(yīng)用價(jià)值。 7.采用DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-200凝膠柱層析相結(jié)合的方法對(duì)兩個(gè)品種南瓜多糖進(jìn)行分級(jí)，獲得六個(gè)精制多糖組分ZPP1a，ZPP2，ZPP3和YPP1，