集座殼孢(Aschersonia badia)生物學(xué)特性的初步研究.pdf

1、座殼孢菌是吸汁性害蟲(chóng)蚧和粉虱的重要病原,但其重要成員集座殼孢菌的生物學(xué)特性研究較少。本論文對(duì)集座殼孢的分離純化、菌種鑒定、基本生物學(xué)特性、培養(yǎng)基優(yōu)化以及次生代謝產(chǎn)物活性等進(jìn)行了初步研究,旨在為深入研究和開(kāi)發(fā)該菌奠定基礎(chǔ)。
　　 對(duì)采集于廣東省四會(huì)市的樣品(簡(jiǎn)稱為GDSH-1)進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,獲得其形態(tài)學(xué)特征,通過(guò)子座徒手切片并測(cè)量記錄獲得子座、分生孢子器、孢子等形狀與大小。子座盤狀,橘黃至淺褐色,有1～3個(gè)分散的分生孢子器孔口,

2、周圍有較寬齊整的黃色囊基膜,子座直徑1.2mm,高0.7mm;分生孢子器扁圓形,441×277.μm,頂壁距子座表面120μm,孢子器內(nèi)有側(cè)絲,前期很多,后期較少,50.9～118.μm;分生孢子梭形或紡錘形,兩端尖銳,10.0～13.0×1.2～2.0μm。與已報(bào)道的座殼孢屬成員比對(duì),初步將其鑒定為集座殼孢菌。隨后,克隆了該菌的核糖體大亞基(LSUrDNA)序列,其長(zhǎng)度為1.03kb,將其利用CUJSTALX軟件與GenBank登錄的

3、該屬不同物種LSUrDNA進(jìn)行同源序列比對(duì),再借助MEGA4.0軟件構(gòu)建其系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)并獲得遺傳距離,結(jié)果表明GDSH-1為集座殼孢菌。
　　 本論文研究了碳源、氮源、大量元素、微量元素和維生素對(duì)其孢子萌發(fā)、菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響。結(jié)果顯示,蔗糖和酵母粉分別為最有利于該菌生長(zhǎng)的碳源與氮源,大量元素中的鎂、鐵、硫、磷和鉀都對(duì)其生長(zhǎng)有很大影響,微量元素中鋅離子的影響最小,維生素不促進(jìn)生長(zhǎng),多數(shù)反而抑制其生長(zhǎng);產(chǎn)孢實(shí)驗(yàn)表明,葡萄糖和酵母粉

4、分別為有利于產(chǎn)孢的碳、氮源,大量元素對(duì)于產(chǎn)孢是必需的;錳離子、銅離子和維生素B2、B6明顯促進(jìn)產(chǎn)孢;碳源中可溶性淀粉促進(jìn)孢子萌發(fā),氮源中L-甘氨酸和干酪素顯著促進(jìn)萌發(fā)而L-甲硫氨酸明顯抑制萌發(fā),大量元素中的硫和鐵對(duì)萌發(fā)無(wú)明顯影響而鉀和磷為孢子萌發(fā)所必需,微量元素中除錳離子均抑制萌發(fā),維生素中VB4和VB6都顯著地促進(jìn)萌發(fā)。利用正交試驗(yàn)優(yōu)化培養(yǎng)基,最有利于菌絲生長(zhǎng)的優(yōu)化培養(yǎng)基成分每升包含蔗糖(40g)、酵母粉(7.5g)、K2HPO4(1