dl-96試劑 sop文件

1、XXX檢驗科臨床微生物實驗室DL96細菌測定系統(tǒng)標準操作規(guī)程編號：WSWSOP1日期：年月版號：第1頁，共4頁【目的目的】規(guī)范DL96細菌測定系統(tǒng)隨機體外診斷試劑操作規(guī)程，保證檢驗質(zhì)量。【該SOPSOP變動程序變動程序】本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準簽字：專業(yè)主管、科主任?！驹碓怼吭噭┌逵缮磻缀涂咕幬颩IC測定孔組成。在生化反應孔中加入細菌懸液，經(jīng)3537℃孵育，在細菌代謝作用下

2、生化反應直接顏色變化或經(jīng)加入顯色劑后產(chǎn)生顏色變化；抗菌藥物MIC采用微量肉湯稀釋法，加入還有細菌的MH肉湯培養(yǎng)基，經(jīng)3537℃孵育，根據(jù)試驗孔是否出現(xiàn)渾濁（沉淀）確定細菌是否生長。測定系統(tǒng)采用比色法對各項生化反應進行結(jié)果判定，根據(jù)細菌生化反應的概率來完成細菌的鑒定；測定系統(tǒng)通過比濁法對抗生素進行MIC半定量測定分析MIC值?！静僮鞒绦虿僮鞒绦颉?使用本試劑板的基本要求：1.1無特殊營養(yǎng)要求的革蘭氏陽性菌、革蘭陰性菌和真菌等病原菌1.21

3、824小時分離培養(yǎng)的單個純菌落（或純培養(yǎng)物）。2隨機試劑板的選擇：2.1根據(jù)待測菌的培養(yǎng)特性、菌落特征、氧化酶實驗、觸酶試驗結(jié)果以及革蘭染色情況，選擇好相應的試劑板。2.2試劑板的選擇DL96E、DL96NE、DL96STAPH、DL96STREP、DL96FUNGUS3試劑板的接種3.1菌懸液與藥敏液的配置菌懸液制備：挑取純培養(yǎng)單個菌落于稀釋液瓶內(nèi)壁研磨呈細菌懸液，要求如下：DL96E、DL96NE、DL96STAPH的菌懸液都制備0

4、.5麥氏單位；DL96STREP菌懸液制備2麥氏單位；DL96FUNGUS菌懸液都制備1麥氏單位；藥敏液的配置：具體請見細菌測定系統(tǒng)隨機體外診斷試劑板使用說明書3.2試劑板的接種3.2.13.2.1DL96EDL96E試劑板試劑板:適用于氧化酶試驗陰性的革蘭氏陰性桿菌的鑒定和抗菌藥物適用于氧化酶試驗陰性的革蘭氏陰性桿菌的鑒定和抗菌藥物MICMIC測定。測定。3.2.1.1菌懸液制備：挑取純培養(yǎng)單個菌落于稀釋液瓶內(nèi)壁研磨呈細菌懸液（0.5

5、麥氏單位）。3.2.1.2用連續(xù)移液器（配無菌移液吸頭）吸取該菌懸液加入試劑板A1A12、B1B12和C1—C4孔內(nèi)，每孔XXX檢驗科臨床微生物實驗室DL96細菌測定系統(tǒng)標準操作規(guī)程編號：WSWSOP1日期：年月版號：第1頁，共4頁3.2.4.6用連續(xù)移液器（配無菌移液吸頭）吸取該菌懸液加入試劑板A5A12孔內(nèi)，每孔100μl。3.2.4.7吸菌懸液500μl，加至肉湯培養(yǎng)基A內(nèi)，充分混勻，繼續(xù)加入試劑板A1A4、B1B7孔內(nèi)，每孔10

6、0μl。3.2.4.8在A1A4、A9、B1B7孔分別滴加無菌石蠟油2滴。3.2.4.9吸剩余肉湯培養(yǎng)基A50μl，加至肉湯培養(yǎng)基B內(nèi)，充分混勻，繼續(xù)加入試劑板的其余各孔（所有的抗菌藥物MIC測定試驗孔、生長對照孔C及6.5%NaCl），每孔100μl，并在C1孔滴加無菌石蠟油2滴。3.2.4.10剩余的菌液及吸頭浸入殺菌溶液內(nèi)浸泡滅菌。3.2.53.2.5DL96FUNGUSDL96FUNGUS試劑板試劑板:適用于真菌的鑒定和抗菌藥物

7、適用于真菌的鑒定和抗菌藥物MICMIC測定。測定。3.2.5.1菌懸液制備：挑取純培養(yǎng)單個菌落于稀釋液瓶內(nèi)壁研磨呈菌懸液(1個麥氏單位)。3.2.5.2用連續(xù)移液器（配無菌移液吸頭）吸取該菌懸液100μl加至同化稀釋液內(nèi)，充分混勻，加入試劑板C1C11和D1D12孔內(nèi)，每孔100μl。3.2.5.3用連續(xù)移液器（配無菌移液吸頭）吸藥敏稀釋液100μl加入E12孔內(nèi)。3.2.5.4再吸菌懸液20μl，加至藥敏稀釋液內(nèi)，充分混勻，加入試劑板

8、E1E11和F2F12孔內(nèi)，每孔100μl。3.2.5.5剩余的菌液及吸頭浸入殺菌溶液內(nèi)浸泡滅菌。3.3試劑板的孵育撕開不開膠的紙對齊貼于測試板，3537℃孵育（DL96FUNGUS試劑板放置30℃濕盒內(nèi)孵育）4隨機試劑板的檢測4.1試劑板孵育培養(yǎng)1824小時后（個別生長緩慢可延長3648小時）檢測試劑板，按照使用說明的要求向DL96E、DL96NE、DL96STAPH、DL96STREP測試板加入輔助試劑。4.1.1DL96E：先于A

9、12孔（VP）滴加VP試劑A、B各1滴，20分鐘后，再于A11孔（IND）滴加靛基質(zhì)試劑1滴，數(shù)分鐘后，于A10孔（PHE）滴加苯丙氨酸試劑1滴，立即判讀結(jié)果。4.1.2DL96NE：1.先于A11孔（IND）滴加靛基質(zhì)試劑1滴，數(shù)分鐘后，再于A10孔（NIT）滴加硝酸鹽還原試劑A、B各1滴，立即判讀結(jié)果。4.1.3DL96STAPH：先于A12孔（VP）滴加VP試劑A、B各1滴，30分鐘后，再于A10孔（PYR）滴加PYR試劑1滴及A