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文檔簡(jiǎn)介
1、基因組DNA提取試劑盒簡(jiǎn)介DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,為了進(jìn)行測(cè)序、雜交、基因表達(dá)、文庫(kù)構(gòu)建等試驗(yàn),獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提,因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中最重要、最基本的操作之一。Solarbio公司提供各種不同樣品基因組DNA提取試劑盒,如植物、動(dòng)物、細(xì)菌、細(xì)胞、血液、酵母等基因組DNA提取試劑盒。所提取的基因組純度高,片段大小在50kb左右。
2、用戶可根據(jù)需要選用不同的試劑盒來(lái)進(jìn)行不同樣品的抽提。一、基因組DNA提取的原則1、保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性(因?yàn)檫z傳信息全部?jī)?chǔ)存在核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)中,故完整的一級(jí)結(jié)構(gòu)是保證核酸結(jié)構(gòu)與功能研究的基層)。2、排除其它分子(如蛋白質(zhì)、多糖、脂類(lèi)、有機(jī)溶劑等)的污染,使下游試驗(yàn)順利進(jìn)行。二、基因組DNA提取的原理和方法DNA與組蛋白構(gòu)成核小體,核小體纏繞成中空的螺旋管狀結(jié)構(gòu),即CTAB法:適用于植物組織、真菌等。CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑,可溶解細(xì)
3、胞膜,并與核酸形成復(fù)合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中(0.7MNaCl)是可溶的,通過(guò)有機(jī)溶劑抽提,去除蛋白、多糖、多酚等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。SDS法:適用于細(xì)菌、血液、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等。SDS是一種陰離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,裂解細(xì)胞,使蛋白質(zhì)變性、染色體解析。其它裂解方法:物理方式:機(jī)械剪切、超聲波破碎、研磨勻漿等化學(xué)方式:異硫氰酸胍、堿裂解等酶法:蛋白酶K3、DNA分離純化純化要求:核酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶(如核酸
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