分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及答案

1、1分子生物學(xué)復(fù)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考思考題21寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，以及以及5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）。廣義上:分子生物學(xué)包括對蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義概念:既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸

2、（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有：基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能，DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，基因表達(dá)調(diào)控的研究，DNA重組技術(shù)，結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）:1.1.1944年著名微生物學(xué)家Avery等人在對肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗中證實(shí)了DNA是生物的遺傳物

3、質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長期以來，許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn)，在遺傳學(xué)上樹立了DNA是遺傳信息載體的理論。2.2.2.1953年，是開創(chuàng)生命科學(xué)新時代具有里程碑意義的一年，Watson和Crick發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文，他們在Franklin和WilkinsX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律奠定了堅實(shí)的理論基礎(chǔ)。同年，Sange

4、r歷經(jīng)8年，完成了第一個蛋白質(zhì)——胰島素的氨基酸全序列分析。3.3.1954年Gamnow從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律Crick在前人研究工作基礎(chǔ)上，提出了中心法則理論，對正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動作用。4.4.1956年Volkin和Astrachan發(fā)現(xiàn)了mRNA(當(dāng)時尚未用此名)。5.5.1985年Saiki等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)；Sinsheimer首先提出人類基因組圖譜制作計劃設(shè)想；Smith等報導(dǎo)了

5、DNA測序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法；Miller等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。2.2.作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性，研究具有哪些特性，研究DNADNA一級結(jié)構(gòu)有什么重要意一級結(jié)構(gòu)有什么重要意義，什么是義，什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)？有哪些類型？解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)？有哪些類型？解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體，它拓?fù)洚悩?gòu)體，它們之間互變異構(gòu)依賴于什么？簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何們之間互變異

6、構(gòu)依賴于什么？簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何組裝的？有幾種組蛋白參與核小體的形成？組裝的？有幾種組蛋白參與核小體的形成？作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性：①貯存并表達(dá)遺傳信息；3堿滴定曲線改變；生物活性喪失等。引起DNA變性的主要因素有：溫度、pH值、有機(jī)溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個條件：①一定的離子強(qiáng)度，用以削弱兩條鏈中磷酸基團(tuán)之間的排斥力。②較高的溫度，用以避免隨機(jī)形成的

7、無規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括：（1）DNA分子的復(fù)雜程度。（2）DNA的濃度。（3）DNA片段的大小。（4）溫度的影響。（5）陽離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實(shí)驗的標(biāo)準(zhǔn)條件是：400核苷酸長度，Tm=25℃的溫度，陽離子強(qiáng)度0.18molL，此時的復(fù)性速度常數(shù)к≈5105。通過下列3種方法可以測定DNA序列復(fù)性的程度：（1）S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。（2）減色效應(yīng)，在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260的光吸收值；（3）S1核酸酶只催化單

8、鏈DNA的水解，不能作用于雙鏈DNA，因此將樣品限定水解后測定抗羥基磷灰石層析，羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽，經(jīng)過一定的處理后，具有吸附雙鏈DNA的能力，洗脫時，只允許單鏈通過，從而可以計算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的Tm值大小一般與下列因素有關(guān)：（1）DNA的均一性。(2)GC對含量。(3)介質(zhì)中離子強(qiáng)度。以CC0對COt作圖得到的復(fù)性對濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為Cot曲線。分子雜交有多種類型，將不同來源的DNA變性后，在溶液里進(jìn)行雜交，

9、稱為溶液雜交（solutionhybridization）；用硝酸纖維素制成的濾膜，可以吸附單鏈DNA或RNA，將變性DNA或RNA吸附到濾膜上，再進(jìn)行雜交，稱為濾膜雜交（filterhybridization）。濾膜雜交包括（1）Southern印跡法用于檢測DNA。（2）Nthern印跡法用于檢測RNA。（3）Westhern印跡法用于檢測蛋白質(zhì)。4.4.簡述基因的概念？什么是反向生物學(xué)？什么是順反子？現(xiàn)代分子生物學(xué)中簡述基因的概念

10、？什么是反向生物學(xué)？什么是順反子？現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與基因是什么關(guān)系？順反子與基因是什么關(guān)系？基因（gene）是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能，在體外使基因突變，再導(dǎo)入體內(nèi)，檢測突變的遺傳效應(yīng)，即以表型來探索基因的結(jié)構(gòu)。一個順反子就是一段核苷酸序列，能編碼一條完整的多肽鏈?，F(xiàn)代分子生物學(xué)文獻(xiàn)中，順反