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1、1分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題(2004.10.)(2004.10.)1寫(xiě)出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,以及寫(xiě)出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義,現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容,以及5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡(jiǎn)要內(nèi)容)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡(jiǎn)要內(nèi)容)。廣義上:分子生物學(xué)包括對(duì)蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。
2、狹義概念:既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸(基因)的分子生物學(xué),主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過(guò)程。其中也涉及到與這些過(guò)程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究?,F(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有:基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能,DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯,基因表達(dá)調(diào)控的研究,DNA重組技術(shù),結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個(gè)分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)(年代、發(fā)明者、簡(jiǎn)要內(nèi)容):1.1.1944年著名微生物學(xué)家Avery等人在對(duì)肺炎雙球
3、菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了DNA是生物的遺傳物質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長(zhǎng)期以來(lái),許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn),在遺傳學(xué)上樹(shù)立了DNA是遺傳信息載體的理論。2.2.2.1953年,是開(kāi)創(chuàng)生命科學(xué)新時(shí)代具有里程碑意義的一年,Watson和Crick發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文,他們?cè)贔ranklin和WilkinsX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上,推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)
4、律奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。同年,Sanger歷經(jīng)8年,完成了第一個(gè)蛋白質(zhì)——胰島素的氨基酸全序列分析。3.3.1954年Gamnow從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律Crick在前人研究工作基礎(chǔ)上,提出了中心法則理論,對(duì)正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動(dòng)作用。4.4.1956年Volkin和Astrachan發(fā)現(xiàn)了mRNA(當(dāng)時(shí)尚未用此名)。5.5.1985年Saiki等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);Sinsheimer首先提出人類基
5、因組圖譜制作計(jì)劃設(shè)想;Smith等報(bào)導(dǎo)了DNA測(cè)序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法;Miller等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。2.2.作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性,研究具有哪些特性,研究DNADNA一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意義,什么是一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要意義,什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)?有哪些類型?解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)?有哪些類型?解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體,它們之間互變異構(gòu)依賴于拓?fù)洚悩?gòu)體,它們之間互變異構(gòu)
6、依賴于什么?簡(jiǎn)述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何組裝的?有幾種組蛋白參與核小體的什么?簡(jiǎn)述真核生物的染色體結(jié)構(gòu),它們是如何組裝的?有幾種組蛋白參與核小體的形成?形成?作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性:①貯存并表達(dá)遺傳信息;3引起DNA變性的主要因素有:溫度、pH值、有機(jī)溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測(cè)變性最簡(jiǎn)單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個(gè)條件:①一定的離子強(qiáng)度,用以削弱兩條鏈中磷酸基團(tuán)之間的排斥力。②較高的溫度,用以避免隨
7、機(jī)形成的無(wú)規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括:(1)DNA分子的復(fù)雜程度。(2)DNA的濃度。(3)DNA片段的大小。(4)溫度的影響。(5)陽(yáng)離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)條件是:400核苷酸長(zhǎng)度,Tm=25℃的溫度,陽(yáng)離子強(qiáng)度0.18molL,此時(shí)的復(fù)性速度常數(shù)к≈5105。通過(guò)下列3種方法可以測(cè)定DNA序列復(fù)性的程度:(1)S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。(2)減色效應(yīng),在復(fù)性過(guò)程中可跟蹤測(cè)定A260的光吸收值;(3)S1核酸酶
8、只催化單鏈DNA的水解,不能作用于雙鏈DNA,因此將樣品限定水解后測(cè)定抗羥基磷灰石層析,羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽,經(jīng)過(guò)一定的處理后,具有吸附雙鏈DNA的能力,洗脫時(shí),只允許單鏈通過(guò),從而可以計(jì)算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的Tm值大小一般與下列因素有關(guān):(1)DNA的均一性。(2)GC對(duì)含量。(3)介質(zhì)中離子強(qiáng)度。以CC0對(duì)COt作圖得到的復(fù)性對(duì)濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為Cot曲線。分子雜交有多種類型,將不同來(lái)源的DNA變性后,在溶液里進(jìn)
9、行雜交,稱為溶液雜交(solutionhybridization);用硝酸纖維素制成的濾膜,可以吸附單鏈DNA或RNA,將變性DNA或RNA吸附到濾膜上,再進(jìn)行雜交,稱為濾膜雜交(filterhybridization)。濾膜雜交包括(1)Southern印跡法用于檢測(cè)DNA。(2)Nthern印跡法用于檢測(cè)RNA。(3)Westhern印跡法用于檢測(cè)蛋白質(zhì)。4.4.簡(jiǎn)述基因的概念?什么是反向生物學(xué)?什么是順?lè)醋??現(xiàn)代分子生物學(xué)中順?lè)醋?/p>
10、與簡(jiǎn)述基因的概念?什么是反向生物學(xué)?什么是順?lè)醋??現(xiàn)代分子生物學(xué)中順?lè)醋优c基因是什么關(guān)系?基因是什么關(guān)系?基因(gene)是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能,在體外使基因突變,再導(dǎo)入體內(nèi),檢測(cè)突變的遺傳效應(yīng),即以表型來(lái)探索基因的結(jié)構(gòu)。一個(gè)順?lè)醋泳褪且欢魏塑账嵝蛄校芫幋a一條完整的多肽鏈?,F(xiàn)代分子生物學(xué)文獻(xiàn)
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