葛根素對(duì)大鼠腹膜炎誘導(dǎo)的SIRS和MODS防治作用的研究.pdf

1、全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)是1991年由ACCP/SCCM(美國(guó)胸科醫(yī)師協(xié)會(huì)和危重病醫(yī)師協(xié)會(huì))提出的一個(gè)新概念.SIRS是因?yàn)楦腥净蚍歉腥疽蛩刈饔糜跈C(jī)體而引起的一種全身性炎癥反應(yīng)臨床綜合征,具有以下各項(xiàng)中的2項(xiàng)或者2項(xiàng)以上者,SIRS診斷即可成立: ①體溫>38℃或<36℃; ②心率>90次份; ③呼吸頻率>20次份或PaCO<,2><32mmHg(4.3kPa); ④白細(xì)胞計(jì)數(shù)>12×10<'9>/

2、或<4.010<'9>/L或幼稚粒細(xì)胞>10﹪. 2001年12月,ACCP等組織修改了診斷標(biāo)準(zhǔn),納入更廣的癥狀和征象范疇,其中包括了寒戰(zhàn)、尿量減少、皮膚灌注降低、血小板計(jì)數(shù)下降、高血糖以及無(wú)法解釋的精神狀態(tài)改變等.近期還提出SIRS是機(jī)體針對(duì)免疫觸發(fā)而同時(shí)產(chǎn)生的過(guò)度炎癥、凝血以及被削弱的纖溶三種過(guò)程之間復(fù)雜的相互作用的結(jié)果,這是SIRS病理生理學(xué)的核心. SIRS的發(fā)生主要與全身炎癥系統(tǒng)功能紊亂,大量炎癥因子的產(chǎn)生和釋

3、放,繼而產(chǎn)生全身炎癥瀑布反應(yīng)有關(guān),SIRS是MODS的發(fā)病基礎(chǔ),炎癥因子的失控性釋放也是SIRS向MODS轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵.因此,針對(duì)炎癥因子的治療具有較強(qiáng)的臨床應(yīng)用價(jià)值.國(guó)內(nèi)外以往使用諸如清除內(nèi)毒素、調(diào)節(jié)免疫功能、臟器功能的支持、改善營(yíng)養(yǎng)代謝紊亂等方法防治SIRS,卻始終無(wú)法得到滿意的療效. 中藥葛根素源自豆科植物野葛的干燥根,主要成分為8-β-D吡喃葡萄糖-4,7-二羥異黃酮甙.近年來(lái),隨著臨床研究以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的不斷深入,葛根素對(duì)

4、于腦組織和心肌缺血再灌注后炎癥因子的調(diào)節(jié)作用已經(jīng)有了一定的報(bào)道.本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)SIRS動(dòng)物模型的建立,探討葛根素對(duì)于SIRS的炎癥因子(TNF-α;IL-6; IL-10)的影響,從而為尋找中醫(yī)防治SIRS提供實(shí)驗(yàn)依據(jù). 目的:通過(guò)SIRS動(dòng)物模型的建立,探討葛根素對(duì)于SIRS的防治及相關(guān)作用機(jī)理研究. 材料: 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠:清潔級(jí),5-7周齡,體重160-200g,雌雄各半,恒溫22攝氏度室內(nèi)

5、飼養(yǎng)，正常光照時(shí)間上午8點(diǎn)至晚上8點(diǎn)，無(wú)飲食飲水限制。本實(shí)驗(yàn)采用胡森后提供的動(dòng)物SIRS標(biāo)準(zhǔn)，以直腸溫度較正常升高或者降低1度和白細(xì)胞總數(shù)超過(guò)對(duì)照值的2倍或減少50﹪的作為大鼠SIRS選取標(biāo)準(zhǔn)。 2.實(shí)驗(yàn)分組 在成功制模的基礎(chǔ)上,動(dòng)物被隨機(jī)分成五個(gè)組:A組(12只)為正常對(duì)照組;B1、B2組(每組12只)為1000mg/kg(體重)酵母多糖混懸液誘導(dǎo)的SIRS組;C1、C2組(每組12只)為750mg/kg(體重)酵母多

6、糖混懸液誘導(dǎo)的SIRS組;其中B2、C2組尾靜脈注射葛根素(100mg/2ml/amp)0.25ml/200g;A、B1、C1組尾靜脈注射生理鹽水0.25ml/200g. 實(shí)驗(yàn)SD大鼠在實(shí)驗(yàn)前18h開始禁食(不禁水),上午8時(shí)先稱重、測(cè)直腸溫度,然后腹腔注射酵母多糖混懸液,立即尾靜脈注射葛根素或者等量生理鹽水,1次/日/只. 3.觀察項(xiàng)目 大鼠腹膜炎誘導(dǎo)的SIRS模型的成模率. 大鼠SIR模型死亡率的觀察

7、對(duì)比(B1和B2組). 大鼠SIR模型相關(guān)炎癥因子IL-10、IL-6、TNF-α的檢測(cè)對(duì)比(C1和C2組). 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(X~S)表示.組間先行F檢驗(yàn),再行t檢驗(yàn),p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p<0.01為差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 結(jié)果: 1.成功的創(chuàng)建了大鼠腹膜炎誘導(dǎo)的SIRS模型體溫和白細(xì)胞總數(shù)變化中符合SIRS標(biāo)準(zhǔn)的有兩組(腹腔注射1000mg/kg組

8、和750mg/kg組),成模率分別為83.3﹪和91.6﹪.鑒于腹腔注射1000mg/kg組大鼠快速向MODS甚至MOF發(fā)展,導(dǎo)致大鼠較高的死亡率,故本實(shí)驗(yàn)采用此組作為正式實(shí)驗(yàn)中死亡率對(duì)比組(B1、B2)的劑量.而腹腔注射酵母多糖750mg/kg組大鼠死亡率低,實(shí)驗(yàn)可行性高,作為正式試驗(yàn)中炎癥因子對(duì)比組(C1、C2)的劑量. 2.在葛根素的干預(yù)下,降低了SIRS組大鼠48h死亡率,與對(duì)照組比較有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但對(duì)SIRS組大

9、鼠24小時(shí)死亡率影響與對(duì)照組無(wú)顯著差異(附表3).注:與A組相比,B1組中24h、48h死亡率有顯著升高(P<0.01);與B1組相比,B2組中24h死亡率無(wú)明顯差異,48h死亡率顯著降低(P<0.01). 3.葛根素對(duì)SIRS炎癥因子的調(diào)節(jié)作用:促炎因子TNF-α、IL-6分泌顯著減少.(附表4)抗炎因子IL-10分泌顯著增加(附表4). 結(jié)論: 1.酵母多糖石蠟油混懸液腹腔注射建立大鼠SIRS模型成功.