活血化瘀方劑對(duì)急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討中藥活血化瘀方劑對(duì)大鼠視網(wǎng)膜急性高眼壓損傷的保護(hù)作用及對(duì)低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)表達(dá)水平的影響。方法140只清潔級(jí)健康成年Wistar大鼠隨機(jī)分為四個(gè)組：正常對(duì)照組10只、穿刺組10只、加壓組60只和治療組60只。穿刺組大鼠左眼行前房穿刺，加壓組和治療組大鼠左眼采用前房灌注加壓法制作急性高眼壓模型維持60min，加壓組大鼠分別于加壓后2h，12h，1d，3d，7d，14d每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取10只處死，治療組在加壓后即刻

2、給予活血化瘀方劑灌胃，4ml/d，并分別在給藥后2h，12h，1d，3d，7d，14d每個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取10只處死。正常對(duì)照組、穿刺組及加壓組、治療組各時(shí)間點(diǎn)10只老鼠中隨即取5只采用HE染色在光鏡下觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)學(xué)改變，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HIF-1α蛋白表達(dá)量的變化；剩余5只采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Real-TimeqRT-PCR)方法檢測(cè)HIF-1αmRNA的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：1．光鏡：加壓組2h，視網(wǎng)膜輕度

3、水腫；12h，水腫加重，厚度增加；1d，全層高度水腫，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)排列疏松；3d，水腫減輕，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層(GCL)輕度變??；7d，水腫基本消失，視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)排列紊亂，殘留RGCs數(shù)目少；14d，視網(wǎng)膜萎縮變薄，RGCs數(shù)目稀少，細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則。加壓+用藥組變化趨勢(shì)與加壓組基本相同，2h、12h小組視網(wǎng)膜變化與加壓組同一時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差別，其他各時(shí)間點(diǎn)視網(wǎng)膜損傷程度均較加壓組同一時(shí)間點(diǎn)輕。
　　 2．免疫組織化學(xué)染色：

4、加壓組2hGCL出現(xiàn)HIF-1α弱陽(yáng)性表達(dá)，12h表達(dá)到高峰，然后逐漸降低。加壓+用藥組HIF-1α變化趨勢(shì)同加壓組，除2h、12h小組外，其他各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量均比加壓組同一時(shí)間點(diǎn)低。
　　 3．Real-TimeqRT-PCR:加壓組2hHIF-1αmRNA表達(dá)量即高于正常對(duì)照組，12h達(dá)到高峰，然后逐漸下降；加壓+用藥組變化趨勢(shì)同加壓組，除2h、12h小組外，其他各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量均比加壓組同一時(shí)間點(diǎn)低。結(jié)論1、大鼠視網(wǎng)膜的H