現(xiàn)代分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題

1、版權(quán)所有毛毛雨制作東隅已逝1桑榆非晚！現(xiàn)代分子生物學(xué)一.填空題1.DNA的物理圖譜是DNA分子的限制性?xún)?nèi)切酶酶解片段的排列順序。2.核酶按底物可劃分為自體催化、異體催化兩種類(lèi)型。3.原核生物中有三種起始因子分別是IF1、IF2和IF3。4.蛋白質(zhì)的跨膜需要信號(hào)肽的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)。5.真核生物啟動(dòng)子中的元件通常可以分為兩種：核心啟動(dòng)子元件和上游啟動(dòng)子元件。6.分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容主要包含結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)

2、、基因表達(dá)與調(diào)控、DNA重組技術(shù)三部分。7.證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌體感染大腸桿菌這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是：生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能。8.hnRNA與mRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)：hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過(guò)程中經(jīng)過(guò)剪接、mRNA的5′末端被加上一個(gè)m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)尾巴。9.蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是亞基對(duì)DNA的利用來(lái)說(shuō)是一

3、種經(jīng)濟(jì)的方法、可以減少蛋白質(zhì)合成過(guò)程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響、活性能夠非常有效和迅速地被打開(kāi)和被關(guān)閉。10.質(zhì)粒DNA具有三種不同的構(gòu)型分別是：SC構(gòu)型、oc構(gòu)型、L構(gòu)型。在電泳中最前面的是SC構(gòu)型。11.哺乳類(lèi)RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子中常見(jiàn)的元件TATA、GC、CAAT所對(duì)應(yīng)的反式作用蛋白因子分別是TFIID、SP1和CTFNF1。12.與DNA結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用，轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合的功能域常見(jiàn)有以下幾種螺旋轉(zhuǎn)角

4、螺旋、鋅指模體、堿性亮氨酸拉鏈模體。13.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有：逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法、DNA顯微注射法、胚胎干細(xì)胞法。14.RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFⅡA、TFⅡB、TFIID、TFⅡE他們的結(jié)合順序是：D、A、B、E。其中TFIID的功能是與TATA盒結(jié)合。15.酵母DNA按摩爾計(jì)含有32.8%的T則A為_(kāi)32.8%_G為_(kāi)17.2%_和C為_(kāi)17.2%__。16.操縱子包括_調(diào)控基因、調(diào)控蛋白結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)構(gòu)基因。17.DNA

5、合成儀合成DNA片段時(shí)，用的原料是模板DNA‘TAQ、引物、緩沖液、dNTP。18.在瓊脂糖電泳中，DNA會(huì)向正極移動(dòng)。19.染色體包括蛋白質(zhì)、染色體兩大部分。20.環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)制主要可分為θ形、滾環(huán)形、D環(huán)形三種類(lèi)型。21.轉(zhuǎn)錄的基本過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄的起始、延伸、終止。22.半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用；一方面可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng)；另一方面它又是細(xì)胞壁的成分。所以需要一個(gè)不依賴(lài)于cAMP—CRP的啟動(dòng)子S2進(jìn)行本底水平的永久型合成；同時(shí)

6、需要一個(gè)依賴(lài)于cAMP—CRP的啟動(dòng)子S1對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從S2開(kāi)始，無(wú)G時(shí)轉(zhuǎn)錄從S1開(kāi)始。23.DNA重組技術(shù)也稱(chēng)為基因克隆或分子克隆。最終目的是把一個(gè)生物體中的遺傳信息DNA轉(zhuǎn)入版權(quán)所有毛毛雨制作東隅已逝3桑榆非晚！螺旋DNA松弛化，然后再將切斷的單鏈DNA連接起來(lái)，而不需要任何輔助因子。而大腸桿菌中的DNA旋轉(zhuǎn)酶(DNAgyrase)則的典型的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ，能將負(fù)超螺旋引入DNA分子，該酶能暫時(shí)性地切斷和重新連接雙

7、鏈DNA，同時(shí)需要ATP水解為ADP以供能。基因表達(dá)：遺傳信息從DNA到RNA再到蛋白質(zhì)的過(guò)程。前導(dǎo)肽：分析色氨酸操縱子前導(dǎo)肽的序列發(fā)現(xiàn)，它包括起始密碼子AUG和終止密碼子UGA；如果翻譯起始于AUG，應(yīng)該產(chǎn)生一個(gè)14個(gè)氨基酸的多肽，這個(gè)假設(shè)的多肽被稱(chēng)為前導(dǎo)肽（實(shí)際上還沒(méi)有觀察到）。啟動(dòng)子：?jiǎn)?dòng)子是DNA分子可以與RNA聚合酶特異結(jié)合的部位，也就是使轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的部位。在基因表達(dá)的調(diào)控中，轉(zhuǎn)錄的起始是個(gè)關(guān)鍵。常常某個(gè)基因是否應(yīng)當(dāng)表達(dá)決定于在

8、特定的啟動(dòng)子起始過(guò)程。DNA分子克隆技術(shù)：（也稱(chēng)基因克隆技術(shù)）在體外將DNA分子片段與載體DNA片段連接，轉(zhuǎn)入細(xì)胞獲得大量拷貝的過(guò)程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步驟包括：制備目的基因→將目的基因與載體用限制性?xún)?nèi)切酶切割和連接，制成DNA重組→導(dǎo)入宿主細(xì)胞→篩選、鑒定→擴(kuò)增和表達(dá)。載體（vecs）在細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，并帶動(dòng)重組的分子片段共同增殖，從而產(chǎn)生大量的DNA分子片段。主要目的是獲得某一基因或NDA片段的大量拷貝，有了這些與

9、親本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的結(jié)構(gòu)與功能，隨著引入的DNA片段不同，有兩種DNA庫(kù)，一種是基因組文庫(kù)（genomiclibrary）另一種是cDNA庫(kù)。G蛋白：受體與配體結(jié)合后即與膜上的偶聯(lián)蛋白結(jié)合，使其釋放活性因子，再與效應(yīng)器發(fā)生反應(yīng)。位于受體與效應(yīng)器之間的則是偶聯(lián)蛋白。目前所知的偶聯(lián)蛋白種類(lèi)較多，都屬于結(jié)構(gòu)和功能極為類(lèi)似的一個(gè)家族，由于它們都能結(jié)合并水解GTP，所以通常稱(chēng)G蛋白，即鳥(niǎo)苷酸調(diào)節(jié)蛋白（guaninenu

10、cleotideregulatyprotein）。受體型酪氨酸激酶：蛋白酪氨酸激酶(proteintyrosinekinase，PTK)是一組催化酪氨酸殘基磷酸化的酶，他們通過(guò)從三磷酸腺苷上轉(zhuǎn)移一個(gè)磷原子到酪氨酸殘基上，而使底物蛋白活化.目前，已發(fā)現(xiàn)PTK有100多個(gè)家族成員，他們通過(guò)活化底物蛋白，參與細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終，這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞核內(nèi)，引起某些基因表達(dá)水平的改變，使諸如細(xì)胞生長(zhǎng)之類(lèi)的復(fù)雜的細(xì)胞功能得以調(diào)節(jié).因此在調(diào)節(jié)細(xì)胞的分

11、化、生長(zhǎng)和激活中起到重要作用.根據(jù)PTK的結(jié)構(gòu)，可分為受體型和非受體型PTK兩大類(lèi)，前者又稱(chēng)跨膜PTK，后者又稱(chēng)細(xì)胞內(nèi)PTK.生長(zhǎng)因子受體PTK(受體型酪氨酸激酶或RTK):這一類(lèi)蛋白酪氨酸激酶為跨膜蛋白，其胞外部分為配體結(jié)合區(qū)，中間有跨膜區(qū)，胞內(nèi)部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化結(jié)構(gòu)域.根據(jù)他們的結(jié)構(gòu)不同可分為，表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)家族、胰島素受體家族、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)受體家族和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)家族.

12、cDNA與cccDNA：cDNA是由mRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMPreceptprotein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱(chēng)激活蛋白CAP（cAMPactivatedprotein）回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。micRNA：互補(bǔ)干擾RNA或稱(chēng)反義RNA，與mRNA序列互補(bǔ)