分光光度計(jì)線性分辨范圍測(cè)定

1、1,實(shí)驗(yàn)一 分光光度計(jì)線性分辨范圍測(cè)定,2,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)分光光度計(jì)的工作原理掌握比色測(cè)定的基本操作掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作及最佳濃度范圍的確定,3,二、實(shí)驗(yàn)原理,當(dāng)光線通過(guò)透明溶液介質(zhì)時(shí)，其輻射的波長(zhǎng)有一部分被吸收，一部分透過(guò)、因此光線射出溶液之后，部分光波減少，這種光波的吸收和透過(guò)可用于某些物質(zhì)的定性定量分析。Lambert-Beer定律的適用范圍,4,從上式可以看出，一束單色光通過(guò)溶液后，光波被部分吸收，其吸收多少與溶液濃

2、度和溶液厚度（光徑）成正比對(duì)于同一臺(tái)分光光度計(jì)而言，入射光光強(qiáng)不變；對(duì)于某一待側(cè)物而言，摩爾消光系數(shù)為常數(shù)，當(dāng)光徑也保持不變時(shí)，吸光度與溶液濃度在一定范圍內(nèi)成正比相對(duì)比較的概念,5,三、實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備,1、儀器UV9100分光光度計(jì)2、器材普通試管：25 mL×9移液管：2 mL×1燒杯：250 mL×1洗耳球、滴管：各 2洗瓶、試管架、移液管架：各 1,6,四、試劑的配制,硫氰化鐵（

3、Fe(SCN)3）溶液稱取8.95 g KSCN 和 5.00 g FeCl3·6H2O ，蒸餾水溶解后定容至2 L藥品取用時(shí)務(wù)必規(guī)范操作！德國(guó)女科學(xué)家違規(guī)稀釋濃硫酸導(dǎo)致毀容,7,五、操作步驟,1、教師現(xiàn)場(chǎng)演示如何使用分光光度計(jì)2、取9支試管，按下表所示操作,8,六、結(jié)果處理,1、由0~8號(hào)管的數(shù)據(jù)，以硫氰化鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制曲線自學(xué)使用軟件繪制2、根據(jù)曲線分析分光光度計(jì)線性分辨范圍,9,