保健食品有助于維持血糖健康水平檢驗(yàn)方法

1、保健食品有助于維持血糖健康水平檢驗(yàn)方法1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用成年動(dòng)物，選用小鼠（26±2g）或大鼠（180±20g）,單一性別，每組10-15只。1.2材料1.2.1試劑四氧嗑晚（C4H2N2O4W2O,分子量160.08）或鏈服佐菌素、地塞米松磷酸鈉注射液、葡 萄糖或醫(yī)用淀粉、血糖測定試紙或試劑盒，胰島素、甘油三酯、總膽固醇測定試劑盒1.2.2高熱能飼料豬油10%、蔗糖15%、蛋黃粉15%、酪蛋白5%、膽固醇

2、1.2%、膽酸鈉0.2%、碳酸氫 鈣0.6%、石粉0.4%、鼠維持飼料52.6%1.2.3儀器血糖儀、全自動(dòng)生化儀、可見光分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、天平。1.3劑量分組及受試樣品給予時(shí)間實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組和一個(gè)模型對照組，以人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠） 為其中的一個(gè)劑量組，另設(shè)二個(gè)劑量組，高劑量一般不超過30倍，必要時(shí)設(shè)空白對照組。 同時(shí)設(shè)給予受試樣品高劑量的正常動(dòng)物組。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可延長至45天。1.4實(shí)驗(yàn)方法1

3、.4.1正常動(dòng)物降糖實(shí)驗(yàn)選健康成年動(dòng)物按禁食3-5小時(shí)的血糖水平分組，隨機(jī)選1個(gè)對照組和1個(gè)劑量組。 對照組給予溶劑，劑量組給予高劑量濃度受試樣品，連續(xù)30天，測空腹血糖值（禁食同實(shí) 驗(yàn)前），比較兩組動(dòng)物血糖值。1.4.2高血糖模型降糖實(shí)驗(yàn)方案一1.4.2.1胰島損傷高血糖模型1.4.2.1.1 原理四氧啥味（或鏈服佐菌素）是一種”細(xì)胞毒劑，可選擇性地?fù)p傷多種動(dòng)物的胰島細(xì) 胞，造成胰島素分泌低下，引起實(shí)驗(yàn)性糖尿病。1.4.2.1.2造模

4、方法購入成年動(dòng)物，適應(yīng)3-5天后，隨機(jī)取15只動(dòng)物禁食3-5小時(shí)，測空腹血糖，作為該 批次動(dòng)物基礎(chǔ)血糖值。隨后動(dòng)物禁食24小時(shí)（自由飲水），注射四氧H密呢（用前新鮮配制） 造模,小鼠 45-清醒、安靜狀態(tài)下的血壓、心率的測定。實(shí)驗(yàn)開始后每周測壓1-2次。停止給予受試 樣品之后，一般繼續(xù)觀察直至血壓恢復(fù)至對照組水平或繼續(xù)觀察7-14天。143正常動(dòng)物選健康成年動(dòng)物按142測定血壓、心率。1.5數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定：血壓測定為計(jì)量資料，采用方

5、差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢騷，方 差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值VFO.05,結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值3凡.05, PW0.05,用 多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和-個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì);對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行 適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足止態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍 未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果判定：實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物血壓明顯低于對照組，差異具有顯著性，且對實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物心率和

6、 正常動(dòng)物的血壓及心率無影響，可判定該受試樣品有助于維持血壓健康水平動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽 性。1.6注意事項(xiàng)1.6.1測定動(dòng)物血壓時(shí)室溫應(yīng)保持在25°C。以尾動(dòng)脈間接測壓法測定大鼠血壓時(shí)，需要給大 鼠保溫，應(yīng)注明恒溫盒溫度及保溫時(shí)間。各次血壓測定過程中溫度條件保持一致。1.6.2操作應(yīng)輕柔，減少動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)，大鼠放入固定籠中待大鼠安靜后才可進(jìn)行測量， 大鼠如在測定中出現(xiàn)煩躁、啃咬等應(yīng)激反應(yīng)，應(yīng)重新測量。1.6.3推薦使用無創(chuàng)性小動(dòng)

7、物血壓測定儀器。鼠尾套袖應(yīng)放置于鼠尾的根部，選用松緊適當(dāng) 的套袖。套袖以約20-30mmIIg/s的速度充氣加壓至脈搏波消失之后約20mmHg處。每次 測量間隔一定時(shí)間，記錄心率變化W10次/分、血壓變化W6mniHg的連續(xù)三次讀數(shù)，取其均 數(shù)。1.6.4動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境保持安靜，排除環(huán)境因素對血壓的影響。2人體試食試驗(yàn)2.1受試對象納入標(biāo)準(zhǔn)：血壓處于正常范圍的偏高區(qū)間（正常高值血壓），收縮壓120?139mniHg和/或舒張壓 80?

8、89mmHg者，滿足兩者任一項(xiàng)即可納入。2.2排除者標(biāo)準(zhǔn)：2.2.1年齡在18歲以下或65歲以上、高血壓癥患者、妊娠或哺乳婦女、對受試樣品過敏者。 2.2.2合并有肝、皆和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重全身性疾病患者。2.2.3短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者。2.2.4未按照規(guī)定服用受試樣品，無法判斷功效或因資料不全等影響功效判斷者。2.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組要求：采用組間對照設(shè)計(jì)。按受試者的血壓水平隨機(jī)分為試食組和對照 組，盡可能考慮