高選擇性反應型-OCl熒光探針的設計合成及分析應用.pdf

1、人體內(nèi)的活性氧物質(zhì)(ROS)是導致各種疾病的主要因素，次氯酸作為活性氧其中的一種，是生物體內(nèi)巨噬細胞的衍生物,一般情況下，次氯酸應用時濃度大約控制在10-5-10-2 M，然而，高濃度的次氯酸對人體和動物將產(chǎn)生不利影響。機體內(nèi)，過量產(chǎn)生的次氯酸將導致感染類疾病，例如肺部損傷，類風濕性關節(jié)炎，腎臟疾病等，次氯酸還可以與一系列生物分子快速響應，與多種紊亂型疾病有一定聯(lián)系。另一方面，次氯酸對于神經(jīng)型退行性疾病有治療作用，例如帕金森與腦出血，同

2、時，次氯酸可以促進線粒體透化，溶酶體捕獲，并可以通過鈣通道蛋白的激活促使細胞凋亡。次氯酸作為一種強氧化劑在人體免疫系統(tǒng)中擔當了殺滅病原體的職責，可以調(diào)控炎癥及細胞凋亡。正是因為次氯酸在各種生理、病理過程中擔當著重要的作用，所以實現(xiàn)在機體內(nèi)次氯酸的識別與檢測已經(jīng)成為化學學科發(fā)展中具有挑戰(zhàn)性的前沿課題。
　　但是，次氯酸的檢測有一定的難度，次氯酸在人體內(nèi)濃度低，氧化性強，壽命短，檢測次氯酸的方法靈敏度低，選擇性差。目前檢測次氯酸的小分

3、子熒光探針種類繁多，主要有熒光增強型熒光探針和比率型熒光探針。熒光增強型型熒光探針熒光背景難以去除，探針分布不均，對于定量帶來了極大的不便。而比率型熒光探針由于發(fā)射峰處于不同波長處，去除了背景熒光的影響，并且擴大了熒光測定的動力學范圍。
　　本文報道的檢測次氯酸的小分子熒光探針發(fā)展了新的響應基團，首次以鄰位的炔丙基和肟為響應基團，利用其在次氯酸根作用下發(fā)生環(huán)合反應，生成強熒光的共軛體系擴展的熒光染料對次氯酸進行檢測。
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4、一）設計合成了以萘為熒光母體，以炔丙氧基與肟基為響應基團的特異性檢測次氯酸根的小分子熒光探針。驗證了炔丙氧基，肟基對次氯酸根響應的特異性。在此基礎上，設計合成了以香豆素為熒光母體的次氯酸根檢測的小分子熒光探針。該探針熒光背景更低，在次氯酸作用下熒光強度能夠增加約60倍，靈敏度高，選擇性好，檢測限可以達到38 nM。在0-100μM次氯酸根的作用下，熒光強度隨濃度增大呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為F=5132.84+1643.64[-OCl]

5、μM， R=0.9938，此外探針有良好的光穩(wěn)定性，在生理pH響應良好。
　?。ǘ┰O計合成了以熒光素為母體的次氯酸根檢測的小分子熒光探針。激發(fā)波長在490 nm，發(fā)射波長在530 nm。探針在5當量次氯酸根作用下熒光強度增加了10倍，靈敏度高，選擇性好，在0-40μM次氯酸根濃度范圍內(nèi)，熒光強度隨次氯酸根濃度呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為F=1640.49+245.13[-OCl]μM， R=0.9960，并實現(xiàn)了HepG2細胞內(nèi)源