標(biāo)記免疫的表面增強(qiáng)拉曼光譜研究.pdf

1、標(biāo)記免疫技術(shù)是在免疫反應(yīng)中加入標(biāo)記示蹤物，利用抗原一抗體結(jié)合反應(yīng)的特異性及各種標(biāo)記物的可測(cè)量性來(lái)達(dá)到方便敏感地檢測(cè)各種體內(nèi)微量生物活性物質(zhì)。隨著標(biāo)記技術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用，精密的物理化學(xué)手段引進(jìn)到免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中，傳統(tǒng)的拉曼散射光譜信號(hào)較弱，作為信息讀出手段往往缺乏高靈敏性。而表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)可使信號(hào)增強(qiáng)6～10個(gè)數(shù)量級(jí)。SERS標(biāo)記免疫檢測(cè)是一種將SERS與標(biāo)記免疫學(xué)相結(jié)合，利用SERS的高靈敏度和光譜選擇性，結(jié)合抗體抗原的特異

2、反應(yīng)作用而進(jìn)行的納米標(biāo)記免疫分析技術(shù)。這種新發(fā)展起來(lái)的標(biāo)記免疫分析技術(shù)將生物分析技術(shù)、納米技術(shù)與SERS三者很好的結(jié)合。 本論文對(duì)SERS標(biāo)記免疫檢測(cè)進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。研究基于類似三明治結(jié)構(gòu)的構(gòu)建，對(duì)金屬基底及納米粒子進(jìn)行抗體修飾，基底上的固相抗體與標(biāo)記抗體通過(guò)與抗原的結(jié)合形成“固相抗體-待測(cè)抗原-標(biāo)記抗體”夾心復(fù)合物，利用修飾抗體對(duì)抗原的特異選擇性識(shí)別及金納米粒子與金屬基底間的電磁耦合對(duì)拉曼散射的有效增強(qiáng)效應(yīng)，以標(biāo)記物分子

3、的表面增強(qiáng)拉曼信號(hào)間接表達(dá)抗體對(duì)抗原的識(shí)別作用。在橫向上，對(duì)基底修飾制備及再生性、標(biāo)記分子選擇、檢測(cè)靈敏度提高等方面進(jìn)行了研究，獲得了重要的突破進(jìn)展，得到了詳細(xì)的光譜信息，實(shí)驗(yàn)中極大地提高了抗原檢測(cè)靈敏度，并且通過(guò)探索合適的洗脫試劑進(jìn)行基底再生，得到了較好的效果。在縱向方面，成功地進(jìn)行了單組分至多組分抗原的檢測(cè)；通過(guò)不同光譜特征分子對(duì)不同免疫溶膠進(jìn)行對(duì)應(yīng)標(biāo)記，進(jìn)而組裝三明治結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行了大量的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，成功地進(jìn)行了多組分抗原的同時(shí)識(shí)別檢