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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:川木通系毛茛科植物小木通Clematis armandii Franch.或繡球藤Clematismontana Buch.-Ham.的干燥藤莖。具有利尿通淋,清心除煩,通經(jīng)下乳的作用。目前市場(chǎng)混用嚴(yán)重,飲片鑒別困難,用藥安全性及藥效難以保障,本研究擬從生藥性狀、顯微、薄層定性、DNA條形碼和HPLC特征圖譜基因化學(xué)雙指紋研究,形成綜合研究體系。對(duì)市場(chǎng)占有率較高的川木通混品粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤進(jìn)行初步的化學(xué)成分及藥效研究,為川木通
2、鑒定及替代品使用提供依據(jù)。
方法:本次研究采用石蠟包埋技術(shù)和番紅固綠染色法對(duì)小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的莖進(jìn)行了顯微鑒定,對(duì)四種藥材進(jìn)行了粉末對(duì)比研究;以對(duì)照藥材為對(duì)照建立了川木通TLC鑒別方法。進(jìn)行了川木通藥材的水分、總灰分以及浸出物等檢查項(xiàng)測(cè)定;提取生藥和飲片總DNA,對(duì)DNA的ITS2序列進(jìn)行擴(kuò)增測(cè)序,對(duì)DNA序列進(jìn)行比較分析;采用HPLC法建立了川木通的HPLC特征圖譜,利用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”
3、對(duì)收集到的樣品與小木通和繡球藤進(jìn)行了相似度比對(duì);最后為藥典法定品種與市場(chǎng)習(xí)用品種之間藥效區(qū)別,初步進(jìn)行了藥典品種小木通、繡球藤和非藥典品種粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤的利尿效果比較研究
結(jié)果:從顯微結(jié)果看,初生射線:小木通17條,其它均為12條;繡球藤的韌皮部的厚壁細(xì)胞環(huán)帶不連續(xù)成環(huán),在髓射線處間斷;粗齒鐵線蓮呈現(xiàn)不明顯六凹槽,導(dǎo)管孔粗大;小蓑衣藤橫截面花瓣?duì)?粉末結(jié)果顯示,小木通、繡球藤、粗齒鐵線蓮以及小蓑衣藤在韌皮射線細(xì)胞、石細(xì)胞
4、和導(dǎo)管的形態(tài)及大小上有著不同程度的差別?;贗TS2的DNA條形碼結(jié)果顯示,川木通飲片主要以粗齒鐵線蓮為主,小木通使用較少,未發(fā)現(xiàn)繡球藤;通過NJ樹看出繡球藤、粗齒鐵線蓮和小蓑衣藤三者親緣關(guān)系相近。通過HPLC特征圖譜比對(duì),粗齒鐵線蓮、小蓑衣藤和繡球藤在化學(xué)成分上相似度非常高;通過利尿效果研究發(fā)現(xiàn)粗齒鐵線蓮與川木通一樣均有明顯的利尿效果。
結(jié)論:
1、建立了一個(gè)川木通較為系統(tǒng)鑒定的方法,能準(zhǔn)確有效地將川木通與鐵線蓮屬
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