變性梯度凝膠電泳技術(shù)在微藻鑒定及浮游植物群落結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用.pdf

1、變性梯度凝膠電泳技術(shù)(denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE)是一種重要的分子多態(tài)性技術(shù)，在物種鑒定及浮游生物群落多樣性研究方面有著廣泛的應(yīng)用。本研究將DGGE技術(shù)運(yùn)用到微藻的鑒定中，并運(yùn)用該技術(shù)對(duì)東海、黃海海域及長(zhǎng)江干流的浮游植物多樣性進(jìn)行了研究，探討了多樣性組成與環(huán)境因子的關(guān)系，得出以下結(jié)果： (1)運(yùn)用DGGE技術(shù)，分別針對(duì)核糖體序列的18S rDNA、28S rDNA及I

2、TS區(qū)序列設(shè)計(jì)引物，優(yōu)化了PCR條件，并根據(jù)擴(kuò)增效果選擇18S rDNA和28S rDNA的片段作為特征區(qū)域，通過垂直電泳和時(shí)間進(jìn)程實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步優(yōu)化了DGGE電泳條件，從而獲得了我國(guó)沿海43種常見微藻的特征性條帶，建立了特征性圖譜，為我國(guó)沿海常見微藻的鑒定提供了一種新的手段。 (2)運(yùn)用DGGE技術(shù)對(duì)東海和黃海海域2007年秋季航次的24個(gè)站位表層樣品的浮游植物群落多樣性進(jìn)行了研究。各站位聚類分析的結(jié)果與其所屬海域的環(huán)境特征較為一

3、致；運(yùn)用典范對(duì)應(yīng)分析(Canonical Correspondence Analysis，CCA)對(duì)群落多樣性與理化因子的關(guān)系進(jìn)行了探討，結(jié)果表明浮游植物的種類組成主要受溫度、硅酸鹽和溶解無(wú)機(jī)氮的影響。 (3)2006年4月(平水期)及9月(豐水期)對(duì)長(zhǎng)江干流進(jìn)行調(diào)查，對(duì)表層樣品的浮游植物的群落多樣性進(jìn)行了DGGE分析，探討了浮游植物多樣性與環(huán)境因子的關(guān)系。 分析結(jié)果表明，各站位均呈現(xiàn)較高的浮游植物多樣性；基于各站位的物