新生兒ABO溶血病患兒血中膽紅素對(duì)單核細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白和IL-12表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討新生兒ABO溶血病患兒血中不同濃度的膽紅素對(duì)單核細(xì)胞 TLR4、 NF-κB蛋白和 IL-12表達(dá)的影響。方法：選擇在2015年9月1日至2016年2月29日期間入住四川省人民醫(yī)院本部及城東病區(qū)、龍泉驛區(qū)婦幼保健院的新生兒，包括新生兒 ABO血型不合溶血癥、新生兒暫時(shí)性呼吸增快（濕肺）、新生兒低血糖癥、新生兒低鈣血癥、新生兒咽下綜合征作為研究對(duì)象。所有對(duì)象需符合下列標(biāo)準(zhǔn)：胎齡37～42周、出生體重2500～4000 g、Apg

2、ar評(píng)分正常、羊水清。研究對(duì)象根據(jù)是否發(fā)生溶血分為溶血組和非溶血對(duì)照組，溶血組按膽紅素的濃度分為輕度溶血組（TBIL＜220.6μmol/L）、中度溶血組（TBIL為220.6～307.8μmol/L）和重度溶血組（TBIL≥307.8μmol/L）?；純喝朐簳r(shí)經(jīng)股靜脈穿刺取靜脈血2ml，用于提取單個(gè)核細(xì)胞。采用流式細(xì)胞技術(shù)區(qū)分單個(gè)核細(xì)胞中淋巴細(xì)胞群和單核細(xì)胞群，并檢測(cè)單核細(xì)胞群中溶血組和非溶血對(duì)照組 TLR4、 NF-κB蛋白和 IL

3、-12表達(dá)情況。溶血組經(jīng)丙種球蛋白治療后取靜脈血2ml提取單個(gè)核細(xì)胞，采用流式細(xì)胞技術(shù)區(qū)分淋巴細(xì)胞群和單核細(xì)胞群，并檢測(cè)單核細(xì)胞群中 TLR4、 NF-κB蛋白和 IL-12的表達(dá)情況。結(jié)果：1.根據(jù)納入、排除及中止標(biāo)準(zhǔn)，74例合格病例被納入研究。溶血組中，輕度溶血組納入病例數(shù)為4例，病例數(shù)太少，未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。溶血組和非溶血對(duì)照組病例在性別構(gòu)成、胎齡、分娩方式、出生體重、日齡等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組患兒具有可比性。2.比較各組間

4、單核細(xì)胞表面分子TLR4的表達(dá)，中度溶血組和重度溶血組比非溶血對(duì)照組表達(dá)低（P＜0.01），且重度溶血組比中度溶血組表達(dá)低（P＜0.01），輕度溶血組納入的4例所測(cè)單核細(xì)胞 TLR4表達(dá)的絕對(duì)值接近非溶血對(duì)照組均數(shù)。3.比較各組間單核細(xì)胞NF-κB蛋白的表達(dá)，溶血組比非溶血對(duì)照組表達(dá)低（ P＜0.01），溶血組中重度溶血組比中度溶血組表達(dá)低（ P＜0.01），輕度溶血組納入的4例所測(cè)單核細(xì)胞NF-κB蛋白表達(dá)的絕對(duì)值接近非溶血對(duì)照組均數(shù)

5、。4.比較各組間單核細(xì)胞細(xì)胞因子 IL-12的表達(dá)，中度溶血組和重度溶血組比非溶血對(duì)照組表達(dá)低（ P＜0.01），且重度溶血組比中度溶血組表達(dá)低（P＜0.01），輕度溶血組納入的4例所測(cè)單核細(xì)胞 IL-12表達(dá)的絕對(duì)值接近非溶血對(duì)照組均數(shù)。5.TLR4、NF-κB及 IL-12表達(dá)水平與膽紅素濃度的相關(guān)性分析：（1）單核細(xì)胞 TLR4蛋白的表達(dá)與血漿膽紅素濃度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.6426，P＜0.01）。（2）單核細(xì)胞 NF-κB蛋白的

6、表達(dá)與血漿膽紅素濃度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.5366，P＜0.01）。（3）單核細(xì)胞細(xì)胞因子 IL-12與血漿膽紅素濃度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.3859，P＜0.01）。6.TLR4、NF-κB及 IL-12表達(dá)水平的相關(guān)性分析：（1）單核細(xì)胞 TLR4蛋白的表達(dá)與單核細(xì)胞 NF-κB蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.3994，P＜0.01）。（2）單核細(xì)胞表面分子 TLR4與單核細(xì)胞細(xì)胞因子 IL-12兩者無相關(guān)關(guān)系存在（r=0.1916，P＞0.

7、05）。（3）單核細(xì)胞 NF-κB蛋白與單核細(xì)胞細(xì)胞因子 IL-12兩者無相關(guān)關(guān)系存在（r=0.2116，P＞0.05）。7.溶血組丙球治療前后單核細(xì)胞 TLR4、NF-κB及 IL-12表達(dá)情況比較：（1）比較溶血組丙球治療前后單核細(xì)胞 TLR4的表達(dá)，丙球治療后比丙球治療前表達(dá)高（P＜0.01）。（2）比較溶血組丙球治療前后單核細(xì)胞 NF-κB的表達(dá)，丙球治療后比丙球治療前表達(dá)高（P＜0.01）。（3）比較溶血組丙球治療前后單核細(xì)胞

8、 IL-12的表達(dá)，丙球治療后比丙球治療前表達(dá)高（P＜0.01）。結(jié)論：1.新生兒ABO溶血病患兒血中，中、高濃度膽紅素可下調(diào)單核細(xì)胞表面分子TLR4的表達(dá)，這種下調(diào)作用呈濃度依賴性，血漿膽紅素濃度越高，下調(diào)作用越強(qiáng)，單核細(xì)胞TLR4的表達(dá)越低。2.新生兒 ABO溶血病患兒血中，中、高濃度膽紅素可下調(diào)單核細(xì)胞NF-κB蛋白的表達(dá)，這種下調(diào)作用呈濃度依賴性，膽紅素濃度越高，下調(diào)作用越強(qiáng)，單核細(xì)胞NF-κB蛋白的表達(dá)越低。3.新生兒 ABO