人組織因子抑制物2(TFPI-2)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)mRNA表達(dá)的分子機制.pdf

1、背景：人組織因子途徑抑制物2（TFPI2）是一種含有庫尼樣結(jié)構(gòu)域的絲氨酸蛋白酶抑制劑，它可以影響許多腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移。最近的研究表明TFPI2不僅可以影響細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的完整性，還可以影響許多癌基因的表達(dá)，但TFPI2調(diào)節(jié)基因表達(dá)的分子機制還不是很明確。
　　目的：探討在乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中TFPI2對基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP2）mRNA表達(dá)的影響及其分子機制。
　　方法：
　?。?）通過West

2、ern blot檢測MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)TFPI2的表達(dá)情況。
　?。?）細(xì)胞增殖（MTT）和細(xì)胞侵襲（Transwell）實驗用來檢測TFPI2對MDA-MB-231細(xì)胞功能的影響。
　?。?）Real time PCR分析MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)情況。
　?。?）免疫熒光檢測TFPI2在MDA-MB-231細(xì)胞內(nèi)的分布。
　　（5）熒光素酶報告基因和染色質(zhì)共沉淀實驗檢測

3、TFPI2如何調(diào)控活化蛋白-2（AP-2α）影響MMP2 mRNA的表達(dá)。
　　（6）免疫共沉淀實驗檢測TFPI2與AP-2α之間是否存在相互作用。
　　結(jié)果：
　?。?）TFPI2的表達(dá)抑制MDA-MB-231細(xì)胞的增殖和侵襲。
　?。?）在MDA-MB-231細(xì)胞中，TFPI2的表達(dá)抑制MMP-2 mRNA的表達(dá)。
　　（3）TFPI-2分布在MDA-MB-231細(xì)胞漿及細(xì)胞核中。
　　（4）TF