移動化學(xué)反應(yīng)界面的應(yīng)用：尿液指紋分析和等電聚焦電泳不穩(wěn)定性機(jī)制的再研究.pdf

1、移動化學(xué)反應(yīng)界面(Moving Chemical Reaction Boundary, MCRB)理論可以用于對兩性電解質(zhì)進(jìn)行在線富集,已有的實驗也證明,MCRB理論可以對高鹽樣品進(jìn)行有效的物質(zhì)富集,而不受其中高濃度鹽分的影響,這對于眾多生物樣品如尿液等來說是十分適用的。另一方面,由MCRB理論推導(dǎo)出的判別式可以判斷界面移動方向,為等電聚焦動力學(xué)的研究提供了新的視角。
　　本文的主要研究內(nèi)容是移動化學(xué)反應(yīng)界面理論的應(yīng)用研究。一方面

2、,利用移動化學(xué)反應(yīng)界面理論并結(jié)合毛細(xì)管電泳快速、高效、簡便、經(jīng)濟(jì)和易于自動化的特點,進(jìn)行了尿液指紋分析的研究。快速、靈敏的尿液指紋分析對發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)志物和進(jìn)行臨床檢測具有重要意義。根據(jù)MCRB理論,以Gly-HCl作為樣品緩沖液、Gly-NaOH作背景電解質(zhì)的緩沖液,分別對緩沖液的pH值、濃度、工作電壓等實驗條件進(jìn)行了優(yōu)化。實驗結(jié)果證明該方法大大提高了尿液指紋分析的靈敏度和數(shù)據(jù)的容量,與常規(guī)方法只能獲得10個峰相比,MCRB方法大大改

3、善了尿液指紋分析的靈敏度:觀測到了超過90個的富集峰,達(dá)到了20倍以上的富集效果。表明MCRB介導(dǎo)的富集方法對尿液分析具有巨大潛在價值。另一方面,對大量文獻(xiàn)材料中報道的有關(guān)等電聚焦中pH梯度不穩(wěn)定性的實驗(包括計算機(jī)模擬實驗),采用MCRB理論衍生得到的判別式Rr進(jìn)行分析和預(yù)測,并與實際的結(jié)果相對照。結(jié)果表明,在陰極漂移中,Rr均大于零,即陽極液中氫離子的遷移數(shù)大于陰極液中氫氧根離子的遷移數(shù);而在陽極漂移中,Rr均小于零,即陰極液中氫氧

4、根離子的遷移數(shù)大于陽極液中質(zhì)子的遷移數(shù)。實驗結(jié)果與MCRB的理論是完全一致的,從而揭示出MCRB理論在揭示等電聚焦中pH梯度不穩(wěn)定現(xiàn)象的動力學(xué)方面的正確性和價值。這一結(jié)果對提高等電聚焦電泳的穩(wěn)定性意義重大,而等電聚焦正是雙向電泳和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的重要工具。
　　本文的最后一部分,選用硼砂作為緩沖液,以α-萘胺及NaBH3CN作為衍生化試劑,探索了采用場放大進(jìn)樣方法,用毛細(xì)管電泳對葡萄糖和果糖進(jìn)行分離和富集的實驗條件,最優(yōu)的實驗條