2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  脂肪細胞分泌的瘦素與高血壓的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),但機制不完全清楚。本研究采用不同濃度瘦素相同時間作用于大鼠主動脈平滑肌細胞(VSMCs),觀察瘦素對其環(huán)氧合酶-2(COX-2)及下游產(chǎn)物血栓素A2和前列環(huán)素的影響,以探討瘦素介導的高血壓的發(fā)病機制。
  方法:
  采用組織貼壁法原代培養(yǎng)VSMCs;通過免疫熒光組化檢測VSMCs內(nèi)特異性蛋白平滑肌肌動蛋白(α-actin)以鑒定VSMCs,不同濃度瘦素(10-

2、7、10-8、10-9、10-10、10-11M)同一時間(48h)作用于VSMCs后,實時熒光定量PCR檢測VSMCs的COX-2mRNA的相對表達;Westernblot檢測各組COX-2蛋白的相對表達;酶聯(lián)免疫吸附測定(Elisa)檢測各組細胞上清液中6-酮前列腺素(6-KetoPGF1α)和血栓素B2(TXB2)的分泌程度。
  結(jié)果:
  1、VSMCs培養(yǎng)7天后,組織邊緣萌發(fā)出少量細胞,呈長梭形和多邊形,培養(yǎng)15

3、天后,細胞呈明顯的“波峰波谷”樣改變。
  2、免疫熒光檢測見培養(yǎng)的細胞漿中有特異性表達α-actin蛋白,通過計算得到表達α-actin的細胞陽性率為90%,即培養(yǎng)的VSMCs的純度達90%。
  3、與對照組(PBS處理)相比較,各梯度濃度瘦素處理48小時后,VSMCs的COX-2mRNA及蛋白相對表達量均明顯升高(P<0.05),而在低中濃度瘦素水平時(10-11M、10-10M、10-9M)隨著濃度增加COX-2呈逐

4、漸上升趨勢(10-10M相當于生理濃度),當瘦素水平達高濃度(10-8M、10-7M)后VSMCs的COX-2mRNA及蛋白二者相對表達量逐漸降低(10-9M為出現(xiàn)瘦素抵抗的濃度)。
  4、細胞上清液中6-KetoPGF1α水平的表達趨勢與COX-2基本一致,即與對照組(PBS處理)相比較,各梯度濃度瘦素處理48小時后,VSMCs分泌的6-KetoPGF1α蛋白表達量均明顯升高(P<0.05),而在低中濃度瘦素水平時(10-11

5、M、10-10M、10-9M)隨著濃度的增加6-KetoPGF1α呈逐漸上升趨勢;當瘦素水平達高濃度后(10-8M、10-7M),6-KetoPGF1α表達量反而下降??赡艿脑颍孩偈菟囟拘宰饔茫龠M平滑肌的壞死和凋亡,降低COX-2和6-KetoPGF1α的表達;②瘦素抵抗,有研究認為瘦素在體內(nèi)超過一定濃度時,反饋性的下調(diào)瘦素受體的表達。
  5、細胞上清液中TXB2的表達無顯著差異,TXB2/6-KetoPGF1α比值也無顯著

6、差異,因此瘦素對VSMCs分泌的TXB2及TXB2/6-KetoPGF1α無顯著影響(P>0.05)。
  結(jié)論:
  瘦素明顯增加VSMCs的炎癥因子COX-2表達,這可能與高血壓(是一種慢性炎癥疾?。┑陌l(fā)生發(fā)展有關(guān);瘦素明顯增加COX-2的下游產(chǎn)物舒張血管物質(zhì)6-KetoPGF1α的表達,這又利于血壓下降,說明瘦素對VSMCs的作用具有復雜性;選擇性COX-2抑制劑因在抑制COX-2的同時也可能抑制其下游6-KetoPG

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