2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩83頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、蛋白質(zhì)內(nèi)含子是位于宿主蛋白質(zhì)中的插入序列,在蛋白成熟過程中自我去除,并以肽鍵連接兩側(cè)的宿主蛋白質(zhì)序列(稱為蛋白外顯子),蛋白質(zhì)這一成熟過程被稱為蛋白質(zhì)剪接。斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子是指蛋白質(zhì)內(nèi)含子被分裂成兩部分即N端區(qū)域(IN)和C端區(qū)域(IC),分別由不同的開放閱讀框表達(dá)。斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子的獨特性是能夠分段表達(dá)或合成,并且能夠特異性識別,為蛋白質(zhì)合成和修飾提供了新的途徑,因而在蛋白質(zhì)工程及其它領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
   在蛋白質(zhì)標(biāo)

2、記領(lǐng)域,應(yīng)用新型斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子對目的蛋白特異位點進(jìn)行修飾或標(biāo)記,有助于更深入地研究目的蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。目前在蛋白質(zhì)標(biāo)記領(lǐng)域中所采用的是人工構(gòu)建的斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子,該方法用于定點標(biāo)記的局限性在于:(1)異源宿主中蛋白質(zhì)剪接效率可能大大降低甚至不能發(fā)生剪接反應(yīng),并且其剪接需要的蛋白質(zhì)外顯子的氨基酸也是特定的,限制了蛋白質(zhì)內(nèi)含子的應(yīng)用范圍;(2)大片段的斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子與目的蛋白進(jìn)行融合表達(dá),這樣可能造成目的蛋白可溶性的改變或其它不可知的

3、影響;(3)人工合成小肽增加了實驗成本等。
   為克服上述局限性,本課題構(gòu)建6個新型的S1型斷裂蛋白內(nèi)含子,將其C端半胱氨酸突變?yōu)榻z氨酸,并且將兩側(cè)的天然外顯子替換為一段通用性高的連接小肽(GG-SAG),對新型斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子體內(nèi)和體外的剪接活性進(jìn)行檢測,篩選出合適的斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子進(jìn)行應(yīng)用。
   本文利用實驗室已有的微小蛋白質(zhì)內(nèi)含子進(jìn)行改造,成功構(gòu)建了6個C端無半胱氨酸的S1型斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子(稱為CF-inte

4、in),通過對體內(nèi)剪接活性的分析,篩選出3個具有相對較高剪接活性的斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子(CFRBS1,CFTXS1和CFSXS1)進(jìn)行體外剪接活性檢測。結(jié)果分析表明:CFRBS1 intein具有較穩(wěn)定的剪接活性,較高的剪接活性以及較快的剪接速率;同時模式蛋白的標(biāo)記檢測結(jié)果也顯示,CFRBS1 intein可進(jìn)行蛋白質(zhì)定點標(biāo)記應(yīng)用。
   本課題中期望改造后的S1型斷裂蛋白質(zhì)內(nèi)含子在進(jìn)行應(yīng)用時,特異性較高,不僅可以帶上熒光基團(tuán)、標(biāo)簽

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論