擬南芥近等基因系的建立及擬南芥硼營(yíng)養(yǎng)效率突變體的發(fā)現(xiàn).pdf

1、在后基因組時(shí)代,隨著基因測(cè)序技術(shù)的完善與發(fā)展,數(shù)據(jù)庫(kù)中堆積了浩瀚的資料,與此相應(yīng)的基因功能的研究已經(jīng)日益緊迫.該實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)在油菜中定位了硼營(yíng)養(yǎng)的高效基因,并正在模式植物擬南芥當(dāng)中尋找硼營(yíng)養(yǎng)高效基因以及鑒定它們的功能.通過連續(xù)4個(gè)回交世代和1次自交,建立了擬南芥Columbia硼高效基因近等基因系.該材料已運(yùn)用于芯片研究.主要結(jié)果有:1.建立了擬南芥硼營(yíng)養(yǎng)效率臨界濃度,確定0.002mg/kg的營(yíng)養(yǎng)條件下高效生態(tài)型Lersberg能夠正常

2、結(jié)實(shí)而低效生態(tài)型Columbia不能結(jié)實(shí).2.通過形態(tài)學(xué)標(biāo)記和SSR分子標(biāo)記檢測(cè)了各個(gè)回交世代.同時(shí)通過RI的運(yùn)用加快了育種進(jìn)程.3.得到了表型一致,硼反應(yīng)不同的Columbia的近等基因系,并作為芯片研究的對(duì)比材料供研究使用.在該實(shí)驗(yàn)室通過971項(xiàng)目引進(jìn)的擬南芥啟動(dòng)子陷阱系(promoter trap lines)的基礎(chǔ)上.該實(shí)驗(yàn)對(duì)3400余株硼高效擬南芥突變體進(jìn)行了篩選以及分子生物學(xué)分析,主要結(jié)果有:1.擬南芥突變體B4650在硼濃

3、度為0.002mg/kg的臨界濃度時(shí)表現(xiàn)出與硼低效擬南芥相同的敗育,子房上位等典型的低效性狀.2.通過GUS染色發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致此現(xiàn)象的基因在幼苗根部以及幼苗的葉片當(dāng)中均有表達(dá),該是多位置表達(dá)的基因.3.通過改進(jìn)的熱不對(duì)稱PCR(TAIL PCR)技術(shù)獲取到了導(dǎo)致該突變的擬南芥片段.4.通過BLAST掃描GenBank數(shù)據(jù)庫(kù),發(fā)現(xiàn)該片段與SREBP(sterol-regulatory element binding protein)位點(diǎn)2水解蛋