清濕化瘀法調(diào)控子宮腺肌病小鼠雌激素效應相關(guān)受體.pdf

1、目的采用具有清濕化瘀功效的協(xié)定方劑（內(nèi)異康復片）作用于子宮腺肌病模型小鼠，以雌激素效應相關(guān)受體ERα、ERβ、GPER、PR-A、PR-B為研究靶點，觀察小鼠在用藥前后及疾病發(fā)展的不同時期，子宮局部上述雌激素效應相關(guān)受體隨動情周期變化的表達差異，以期探索清濕化瘀法治療子宮腺肌病的作用機制。
　　方法運用同種異體垂體移植方法建立子宮腺肌病動物模型。隨后將造模小鼠隨機分為3月模型組、6月模型組、內(nèi)異康復片（NYK）高劑量組、中劑量組、

2、低劑量組、丹莪婦康煎膏組（DE，中藥對照組）、孕三烯酮組（GN，西藥對照組）。另設假手術(shù)組及空白對照組。每組均為12只小鼠。常規(guī)飼養(yǎng)3月后，將3月模型組、假手術(shù)組、空白組小鼠分別在動情期與間情期處死。其余各用藥組小鼠及6月模型組在連續(xù)灌胃相應不同濃度的藥物或繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)3月后分別在動情期與間情期處死。采用real-time PCR及western blot技術(shù)檢測小鼠子宮ERα、ERβ、GPER、PR-A、PR-B mRNA及蛋白的表達

3、情況。
　　結(jié)果
　　1.正常組與假手術(shù)組比較：各受體mRNA及蛋白的表達差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2.3月模型組、6月模型組分別與正常組比較：各受體mRNA及蛋白的表達差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.3月模型組與6月模型組比較：各受體mRNA及蛋白的表達差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　4.各治療組與6月模型組小鼠比較：
　?。?）ERα NYK高中劑量組、DE

4、組、GN組mRNA及蛋白的表達，在動情期及間情期均有顯著下降（P<0.05）；NYK低劑量組僅在間情期下降顯著（P<0.05）。
　?。?）ERβ在mRNA水平，動情期及間情期的NYK高劑量組、DE組、GN組均顯著下降（P<0.05）；而NYK中劑量組僅在間情期顯著下降（P<0.05）。在蛋白水平，各治療組均顯著下降（P<0.05）。
　?。?）GPER NYK高劑量組、DE組、GN組mRNA及蛋白的表達，在動情期及間情期均

5、下降顯著（P<0.05）；其余治療組則無顯著差異（P>0.05）。
　?。?）PR-A在mRNA水平，動情期及間情期的NYK高中劑量、DE組、GN組均顯著上調(diào)（P<0.05）；NYK低劑量組僅在動情期表現(xiàn)為顯著上調(diào)（P<0.05）。在蛋白水平，動情期及間情期的NYK高劑量組、DE組、GN組均顯著上調(diào)（P<0.05）；而NYK中劑量組僅在間情期表現(xiàn)為顯著上調(diào)（P<0.05）。
　　（5）PR-B在動情期，僅NYK高劑量組及DE

6、組的mRNA及蛋白表現(xiàn)顯著上調(diào)（P<0.05）；在間情期，僅在NYK高劑量組及DE組的mRNA水平有顯著上調(diào)（P<0.05）。
　　5.動情期與間情期比較：在正常組及假手術(shù)組，各受體mRNA及蛋白的表達在兩期的表達，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在兩模型組，僅在PR-A mRNA水平差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在各治療組，僅NYK高劑量組、DE組、GN組的PR-B蛋白水平差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結(jié)

7、論
　　1.AM的發(fā)生與子宮局部雌孕激素受體表達數(shù)量的變化有關(guān)，本研究結(jié)果顯示為ERα、ERβ、GPER的上調(diào)及PR-A、PR-B受體的下調(diào)。在雌激素受體的異常表達中，新型受體GPER與核受體ERα、ERβ的表達具有一定的同步性，三者發(fā)揮著協(xié)同作用，但以核受體占優(yōu)勢，尤其以ERα為主。另外雌孕激素受體亞型的分布模式的改變及受體周期性表達的喪失也可能是AM發(fā)病的生物學基礎(chǔ)。
　　2.清濕化瘀類方藥可通過降調(diào)子宮局部雌激素受體E

8、Rα、ERβ、GPER的表達，以降低雌激素對子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)細胞的增生作用；同時上調(diào)PR-A、PR-B的表達，以增強孕激素拮抗雌激素的效能；如此雙向靶控調(diào)節(jié)雌激素效應相關(guān)受體的表達，從而改善異常的雌激素效應。
　　3.高劑量內(nèi)異康復片在調(diào)控ERα、ERβ、GPER、PR-A的表達方面與其他治療方法相同；在調(diào)控PR-B的表達方面優(yōu)于西藥對照組。故清濕化瘀類方藥的運用為中醫(yī)藥治療AM提供了一種新的思路方法，值得深入研究與推廣。