中國(guó)孤雌生殖鹵蟲(chóng)十個(gè)地理品系的DNA指紋分析與進(jìn)化.pdf

1、本文應(yīng)用RAPD及ISSR兩種分子生物學(xué)方法對(duì)中國(guó)孤雌生殖鹵蟲(chóng)十個(gè)地理品系的DNA指紋進(jìn)行分析與鑒定,對(duì)等位基因和基因座位在孤雌生殖鹵蟲(chóng)種群中的數(shù)量和分布情況、孤雌生殖鹵蟲(chóng)種群各品系間的遺傳相似系數(shù)和遺傳距離、各品系遺傳相似系數(shù)的聚類(lèi)分析、鹵蟲(chóng)各品系基因組DNA的多態(tài)組成等內(nèi)容進(jìn)行了較深入的研究.采用優(yōu)化后的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,簡(jiǎn)稱(chēng)RAPD)技術(shù),用經(jīng)篩選的40個(gè)10bp

2、隨機(jī)引物對(duì)中國(guó)孤雌生殖鹵蟲(chóng)十個(gè)地理品系的基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,以期從分子水平上了解十個(gè)不同地區(qū)的孤雌生殖鹵蟲(chóng)的遺傳結(jié)構(gòu),比較它們之間的遺傳差異.在擴(kuò)增出的422條多態(tài)片段中,其中371條(87.91％)表現(xiàn)為多態(tài),平均每個(gè)引物擴(kuò)增出10.55個(gè)位點(diǎn).以遺傳相似系數(shù)所作的聚類(lèi)分析圖可以把中國(guó)孤雌生殖鹵蟲(chóng)分為三個(gè)主要類(lèi)群:1.新疆巴里坤、青島尕海鹵蟲(chóng)品系;2.新疆艾比湖鹵蟲(chóng)品系;3.遼寧、山東、河北鹵蟲(chóng)品系.ISSR(inter simpl

3、e sequence repeats)也稱(chēng)錨定簡(jiǎn)單重復(fù)序列(anchored simplesequence repeats,ASSR),用錨定的微衛(wèi)星DNA為引物,即在SSR序列的3'端或5'端加上2-4個(gè)隨機(jī)核苷酸,從而保證了引物與基因組DNA中SSR的5'和3'末端結(jié)合,通過(guò)PCR反應(yīng)擴(kuò)增SSR之間的DNA片段.SSR在真核生物中的分布是非常普遍的,并且進(jìn)化變異速度非?？?因而錨定引物的ISSR-PCR可以檢測(cè)到基因組許多位點(diǎn)的差異