豬糞堆肥中微生物變化規(guī)律及芽孢桿菌分離與鑒定.pdf

1、隨著集約化畜牧業(yè)迅猛的發(fā)展，大量的畜禽糞便造成了環(huán)境污染，并成為限制畜牧業(yè)持續(xù)發(fā)展的重要因素。畜禽糞便中含有豐富的肥源，如果用科學的方法對其處理，不僅可以控制污染，保護環(huán)境，還可以變廢為寶。好氧堆肥工藝具有經(jīng)濟，簡便，不需要外加能源，無二次污染等特點，是目前處理糞便的主要方式之一。
　　 本次試驗在華中農(nóng)業(yè)大學豬場，采用新鮮豬糞摻以輔料，鋸末和米糠，按照條剁式自然堆肥系統(tǒng)自然堆肥。堆肥過程是由相關微生物群體進行的生物轉(zhuǎn)化過程。本

2、試驗通過變性梯度凝膠電泳(DGGE)，傳統(tǒng)富集培養(yǎng)和平板計數(shù)法對堆肥化過程中微生物的區(qū)系動態(tài)變化進行了研究。
　　 堆肥結果表明，在堆肥化過程中，微生物數(shù)量總的趨勢是細菌的數(shù)量最多，放線菌次之，真菌的數(shù)量最少。真菌包括霉菌和酵母菌。升溫期微生物的數(shù)量始終高于高溫微生物。當堆肥發(fā)酵結束后，降溫期微生物的數(shù)量低于發(fā)酵初始水平，高溫放線菌和高溫真菌的數(shù)量試驗結束后低于初始水平，高溫細菌的數(shù)量在整個堆肥化過程中變化不大。通過DGGE分析

3、表明：發(fā)酵過程中細菌的種類發(fā)生了明顯的更迭現(xiàn)象。堆肥初期主要以芽孢桿菌屬，梭菌屬，解脲芽孢桿菌屬等細菌占優(yōu)勢；中期梭菌屬，芽孢桿菌屬，假單孢菌屬等細菌占優(yōu)勢；后期梭菌屬，假單孢菌屬等占優(yōu)勢；而在整個堆肥化過程中芽孢桿菌屬，梭菌屬，和假單孢屬的微生物都是優(yōu)勢菌群。而堆肥輔料的不同，并不明顯影響其中微生物的變化規(guī)律。不論是從堆肥的物理性狀還是化學指標來看，堆體0～30天都快速經(jīng)過了完整的常規(guī)堆肥一次發(fā)酵過程。DGGE檢測表明這個過程中細菌的

4、微生物群落發(fā)生了很大的變化。堆體內(nèi)細菌群類在堆肥期中總體呈振蕩下降，遞減趨勢。
　　 對堆肥中的優(yōu)勢菌群芽孢桿菌進行了相關的研究，包括芽孢桿菌的分離，計數(shù)，初步生理生化鑒定和16SrRNA的核酸菌種鑒定。16SrRNA目前是進行微生物菌種鑒定的主要方法和手段之一，它主要是以原核生物的核糖體小亞基上的16SrRNA中所包含的遺傳信息來進行分類和鑒定。
　　 在堆體中分離的7株芽孢桿菌中，通過形態(tài)特征，培養(yǎng)特性和生理生化指標