番茄耐熱種質(zhì)資源的篩選及苗期耐熱相關(guān)基因的分離.pdf

1、番茄(Lycopersicon esculentum Mill)是最重要的蔬菜作物之一,在人們生活中占有重要的地位。番茄是喜溫植物,但不耐高溫。長期高溫逆境下生長,常伴隨著產(chǎn)量、抗逆性、抗病性下降和商品性差等現(xiàn)象的發(fā)生。隨著全球溫室效應(yīng)的增加,氣候逐漸變暖,番茄耐熱育種越來越受到了人們的重視,番茄耐高溫研究已經(jīng)成為當前番茄研究的一個熱點。本文以10份番茄為材料,通過統(tǒng)計高溫脅迫下坐果率篩選出耐熱番茄和熱敏感番茄各2份。測定這4份番茄材料

2、的電解質(zhì)滲透率和葉綠素熒光參數(shù),篩選番茄耐熱性鑒定指標:并通過cDNA-AFLP技術(shù)分離耐熱相關(guān)基因,為番茄苗期耐高溫研究奠定了基礎(chǔ),為番茄耐高溫育種提供了理論依據(jù)。本論文的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　 1、高溫會造成花粉活力下降,從而影響授粉不良,受精過程紊亂,產(chǎn)生畸形果,甚至落花落果。因此,本實驗通過統(tǒng)計高溫脅迫下的番茄坐果率來衡量番茄高溫耐受能力。本實驗于2009年6-8月在浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院楊渡試驗基地的溫室大棚內(nèi)進行。統(tǒng)計

3、10份番茄材料不同時期的坐果率,發(fā)現(xiàn)‘CLN-2413R’和‘05-161F2-1-13-0-0-0’坐果率較高,高于50％1而‘9246’和‘9185’坐果率較低,低于1％。坐果率與番茄的耐熱性成顯著正相關(guān)。
　　 2、以耐熱番茄‘CLN-2413R’、‘05-161F2-1-13-0-0-0’和熱敏感番茄‘9246’、‘9185’為材料,通過測定高溫脅迫下苗期番茄電解質(zhì)滲透率(EC)和相對電解質(zhì)滲透率(EC％),并與高溫脅迫

4、下番茄坐果率進行相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)高溫脅迫下電解質(zhì)滲透率(EC)與坐果率成顯著負相關(guān)(|R|>0.95),較適合作為苗期番茄耐熱性鑒定指標。
　　 3、利用FM-2便攜式熒光儀測定上述4份番茄材料在高溫脅迫下的葉綠素熒光參數(shù)(Fv’／Fm’、ФPSⅡ、qP、Fv／Fm、Fv／FO、ETR),并與高溫脅迫下坐果率進行相關(guān)性分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn):Fv’／Fm’、qP、Fv／Fm、Fv／FO、ETR與高溫脅迫下的坐果率相關(guān)系數(shù)達到0.9以上(

5、|R|>0.9),即相關(guān)性顯著,可以用來輔助番茄耐熱性的鑒定。
　　 4、應(yīng)用cDNA-AFLP技術(shù)研究了高溫脅迫下耐熱番茄‘CLN-2413R’和熱敏感番茄‘9246’苗期葉片基因差異表達情況,共分離出12條與耐熱相關(guān)的基因(耐熱番茄‘CLN-2413R’:3條；熱敏感番茄‘9246’:9條)。通過BLAST比對,4條基因與番茄熱傳導(dǎo)系數(shù)有關(guān)；1條基因與真核生物中的熒光素酶同源性較高；1條基因是番茄染色體上的序列；2條基因是番