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文檔簡介
1、背景:
在過去十年中,對于腸道微生物的研究越來越多。人類腸道中有大連微生物群,它們的平衡依賴于幾個因素:胃的酸度,腸道蠕動、膽鹽等。微生物失衡也能引起一些疾病的產(chǎn)生或使身體處于不正長的生理狀態(tài)??股啬軌蚴鼓c道菌群失衡,使機會致病菌增加,甚至移位到腸外組織。眾所周知,金黃葡萄球菌和銅綠假單胞菌是條件致病菌,為醫(yī)院感染病原菌。他們似乎有機會有能力促進腸道及呼吸道的感染。不管在社區(qū)感染或是醫(yī)院感染中,他們引起的致病率和死亡率規(guī)模都
2、是很大的。世界流行病中,囊性纖維化的病人最容易受到這些病原菌的侵襲,中從而引起的肺部感染。盡管抗生素的使用對于這些細菌的感染有一定的作用,但是大量藥物使用的危害迫使人們?yōu)檫@些細菌感染的疾病尋求新的治療方法。目前,乳酸菌和雙歧桿菌由于其健康價值與營養(yǎng)價值的功效,因此把它們作為營養(yǎng)添加劑引起了廣泛的興趣。乳酸菌為益生菌已經(jīng)被廣泛接受。它能夠抑制病原菌在機體中的定植,調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng),在維持腸道生態(tài)系統(tǒng)中也起著不可忽視的作用。有證據(jù)表明維持腸道菌
3、群平衡能夠抑制呼吸道及腸道中病原菌的侵染。
目的:
(1)探討口服乳酸菌對于金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌引起的肺部感染的影響。
(2)探討乳酸菌及其細胞提取物對金黃葡萄球菌及銅綠假單胞菌感染腸上皮細胞的影響。
(3)通過分子生物學(xué)技術(shù)證明抗生素與嗜酸乳酸菌對腸道微生態(tài)系統(tǒng)的影響。
材料和方法:
(1)對于肺部感染的研究:氣我攻擊法建立小鼠肺炎模型后連續(xù)7天口服乳酸菌,細菌學(xué)、病
4、理學(xué)、血清細胞因子對肺組織進行評價。同時,人肺A549細胞被用來確定益生菌對肺部感染的作用。
(2)對于腸道菌群的研究:收集小鼠糞便,進行DNA提取及PCR擴增,利用DGGE技術(shù)分析小鼠腸道菌群的結(jié)構(gòu)。對糞便細菌進行計數(shù),通過特殊引物進行PCR擴增,從而分析抗生素和益生菌在腸道菌群中的作用。
(3)對于腸道上皮感染的研究:乳酸菌全細胞極其游離上清液被用來分析人癌LoVo細胞的影響,并用熒光顯微鏡觀察。Bac細菌染色方
5、法檢測金黃葡萄球菌及銅綠假單胞菌侵染后乳酸菌的作用,并用流式細胞術(shù)分析。
結(jié)果:
抗生素干預(yù)后,金黃葡萄球菌及銅綠假單胞菌侵染小鼠腸道菌群中需氧菌數(shù)量減少。通過特殊引物進行PCR反應(yīng)發(fā)現(xiàn),與正常組相比,益生菌組和抗生素組腸桿菌的數(shù)量幾乎相同,而雙歧桿菌在益生菌組顯著增加在抗生素組含量降低(P<0.05)。在這項研究中,發(fā)現(xiàn)乳酸菌全細胞極其上清液能夠顯著抑制病原體所致腸感染的發(fā)生。這一結(jié)果背后的機制可能是干擾胞外聚合物
6、與細胞表面疏水的無集落的形成。在口服乳桿菌組,肺部細菌數(shù)量減少(P<0.05).在益生菌組中,感染引起的促炎因子的釋放被抑制。嗜酸乳桿菌誘導(dǎo)了抗炎因子IL-10的釋放。
結(jié)論:
利用阿奇霉素擾亂腸道微生物能夠使宿主抗感染能力降低。目前工作表明,乳酸菌尤其是嗜酸乳桿菌的使用有助于恢復(fù)腸道菌群的平衡。嗜酸乳桿菌由于其對膽汁酸的耐受能力,在治療腸道感染中是最常用的益生菌。本實驗表明,嗜酸乳桿菌能夠抑制由于金黃色葡萄球菌及銅
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