大鼠休克血清對培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞NF-kB活化的影響及參附注射液的干預作用.pdf

1、目的：
　　 1．觀察失血性休克血清對培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞NF-κB活化的影響。
　　 2．參附注射液對其的干預作用（12h時間點）。
　　 方法：
　　 1．將30只健康SD大鼠隨機分為3組：正常對照組、假休克組、失血性休克組，每組10只。除對照組和假休克組外，其余大鼠均在15min內(nèi)放血致血壓達40mmHg維持60分鐘，即休克模型復制成功，各組均于3小時后取血。
　　 2．空白對照組采用10

2、％FBS+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)：正常對照組采用10％正常對照組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；失血性休克組將10％休克組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，然后將HUVEC接種于6孔培養(yǎng)板中，用上述各種不同培養(yǎng)液分別干預6h、12h和18h。通過蛋白免疫印跡法(Westernblotting)技術檢測刺激后人臍靜脈內(nèi)皮細胞胞核NF-κBp65的表達。
　　 3．空白對照組采用10％FBS+90％RP

3、MI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；正常對照組、假休克組、失血性休克組均采用10％各組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，失血性休克血清加參附注射液干預組培養(yǎng)細胞，參附注射液100ul/ml，先于休克血清1h加入。然后將HUVEC接種于6孔培養(yǎng)板中，用上述各種不同培養(yǎng)液干預12h。通過蛋白免疫印跡法(Westernblotting)技術檢測刺激后人臍靜脈內(nèi)皮細胞胞核NF-κBp65的表達。
　　 結果：
　　 1．與空白對照

4、組、正常對照組比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞12h、18h后，NF-κBp65表達升高，均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2．與空白對照組、正常對照組比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞6h后，NF-κBp65表達無明顯升高，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3．與休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞18h比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞12h后，NF-κBp65表達升高，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

5、
　　 4．與空白對照組、正常對照組及假休克組比較，休克組血清刺激內(nèi)皮細胞12小時后，NF-κBp65表達升高，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 5．與空白對照組、正常對照組及假休克組比較，休克血清加參附干預組刺激內(nèi)皮細胞12小時后，NF-κBp65表達無明顯升高，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 6．與空白對照組、正常對照組相比，假休克組刺激12小時后，NF-κBp65表達無明顯升高，無統(tǒng)計學意義(P