白腐真菌P450降解四溴雙酚A的初步研究.pdf

1、四溴雙酚A(Tetrabromobisphenol A，TBBPA)作為現(xiàn)代電子產(chǎn)品、建筑耗材和塑料產(chǎn)品等生產(chǎn)中不可或缺的材料之一，在全球范圍內(nèi)得到廣泛的使用。研究表明四溴雙酚A是一種潛在的毒性化合物，危害生物體的分泌系統(tǒng)，免疫系統(tǒng)，其污染具有較高的持久性。目前已經(jīng)在水中、土壤中均檢測到四溴雙酚A的存在，四溴雙酚 A通過水，土壤等媒介進入包括人在內(nèi)的生物體內(nèi)，進而在體內(nèi)富集，對生物體產(chǎn)生毒害作用，尋找一種綠色高效的降解方法刻不容緩。

2、r>　　生物酶降解是目前最為高效環(huán)保的降解方法之一，細胞色素P450作為生物酶的一種，與難降解有機物的生物轉(zhuǎn)化密切相關(guān)，又因為白腐真菌是目前所知 P450基因最豐富的真菌，故本實驗選取白腐真菌中的P450來降解四溴雙酚A。首先采用SYBYL-X1.3中的分子對接方法模擬四溴雙酚A與P450的結(jié)合，發(fā)現(xiàn)二者的反應可以自發(fā)進行，然后選擇白腐真菌中的黃孢原毛平革菌為模式生物，開展白腐真菌P450酶對四溴雙酚 A的降解研究工作。研究成果如下：<

3、br>　　1、采用SYBYL-X1.3中分子對接的方法模擬四溴雙酚A與部分P450的CYP家族的對接結(jié)合情況，對接的Total-score均大于0，反應的△G均為負值，表明反應可以自發(fā)進行，為P450對四溴雙酚A的催化降解提供理論參考。
　　2、白腐真菌培養(yǎng)60小時后，加入四溴雙酚A培養(yǎng)24小時，然后測四溴雙酚A的降解率。比較相同條件下加入P450抑制劑胡椒基丁醚的四溴雙酚A的降解率，研究發(fā)現(xiàn)加入P450抑制劑胡椒基丁醚的四溴雙酚

4、A的降解率比不加抑制劑的降解率低，可能是抑制劑抑制了P450的表達或活性，致使四溴雙酚A降解率偏低。
　　3、白腐真菌發(fā)酵培養(yǎng)60小時后，加入四溴雙酚A培養(yǎng)84小時，檢測四溴雙酚 A含量發(fā)現(xiàn)其降解率比培養(yǎng)60小時后加入四溴雙酚A培養(yǎng)24小時降解率高，可能是因為在144小時的培養(yǎng)中，白腐真菌產(chǎn)出的胞外酶與胞內(nèi)酶混合酶液進入到發(fā)酵液中對四溴雙酚A共同起降解作用，而84小時的培養(yǎng)中多數(shù)是產(chǎn)出的胞內(nèi)酶對四溴雙酚A進行降解，因此說明胞內(nèi)胞外