用于線粒體微環(huán)境參數(shù)響應(yīng)的熒光染料研究.pdf

1、對細(xì)胞器的研究一直是認(rèn)識細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的重要方法，線粒體作為細(xì)胞的能量工廠，參與眾多的新陳代謝過程，許多病理學(xué)過程均與它相關(guān)，一直以來都是研究的熱點(diǎn)。雖然目前已報(bào)道許多線粒體相關(guān)的熒光染料，但是大部分只能應(yīng)用于線粒體內(nèi)金屬離子、活性氧物種、有機(jī)小分子或酸堿環(huán)境的響應(yīng)，而對于線粒體內(nèi)黏度或極性響應(yīng)的熒光染料未見報(bào)道，是生物學(xué)研究的薄弱領(lǐng)域，因此，設(shè)計(jì)合成線粒體黏度或極性響應(yīng)的熒光染料對深入探索線粒體在生物過程的細(xì)節(jié)作用具有重要意義。

2、>　　1.將苯基引入到氟硼吡咯(BODIPY)染料的3，5-位，噻唑環(huán)引入到1，7-位，8-位引入吡啶基，合成染料DPT，對中位吡啶氮原子甲基季銨化，得到最終產(chǎn)品M-DPT。通過測試光譜性質(zhì)得知，這兩例熒光染料的發(fā)射波長均處于近紅外光區(qū)(λem, DPT=655nm和λem,M-DPT=718 nm)，特別是M-DPT，在吡啶季銨化后，染料的最大發(fā)射波長紅移到長波長區(qū)域，斯托克斯位移增大到48 nm，熒光發(fā)射光譜不受溶劑和pH值變化的影

3、響，通過理論計(jì)算解釋了波長紅移和斯托克斯位移增大的現(xiàn)象。同時(shí)，M-DPT具有活細(xì)胞通透性，可對線粒體進(jìn)行特異性染色和成像。
　　2.通過對中位醛基取代的五甲川菁染料母體進(jìn)行芐基季銨化得到染料Mito-V。該染料具有兩個(gè)最大吸收（410nm和610nm）和發(fā)射峰（456 nm和665 nm），隨著溶液黏度增加，兩個(gè)熒光發(fā)射強(qiáng)度增加幅度不一致，且長波長與短波長處熒光比率的對數(shù)值，或長波長處熒光壽命的對數(shù)值，均與黏度對數(shù)值之間成良好的線

4、性關(guān)系(R2=0.992和0.998)。Mito-V具有活細(xì)胞通透性，可通過比率熒光和熒光壽命成像兩種方法監(jiān)測線粒體黏度變化。
　　3.將香豆素和芐基季銨化后的苯并噻唑基團(tuán)通過共軛連接得到染料BOB。該染料具有兩個(gè)吸收最大吸收（426nm和561nm）和發(fā)射峰（467nm和645 nm），隨著溶液極性增加，短波長與長波長處熒光強(qiáng)度的比值，與溶液極性值呈良好的線性關(guān)系(R2=0.93)，可通過比率熒光測試溶液極性。BOB具有活細(xì)胞通