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文檔簡介
1、隨著生物技術的迅猛發(fā)展,越來越多的蛋白質和核酸等生物大分子被用于生物醫(yī)藥等方面的研究和應用中,對生物大分子的分離純化提出了很高的要求。生物大分子具有分子量大,結構復雜,以及穩(wěn)定性差等特點,因而對生物大分子的的分離純化操作必須在較溫和的條件下快速高效的進行,以盡可能的保持生物分子的活性和天然構象。
分離介質是分離純化中的關鍵材料,常規(guī)多孔介質分離生物大分子時,由于孔徑較?。ㄒ话阍?00-300?范圍內),會導致分離時間長、生物大
2、分子易失活等問題。為了解決這個問題,具有百納米級孔徑的超大孔微球應用于生物大分子的分離純化中,并取得良好的效果。但是由于目前制備的生物大分子分離介質大多為疏水性介質,生物相容性較差,要將其用于大分子物質的分離純化,必須對其進行表面親水修飾,這就使制備過程更加復雜,同時存在親水修飾層不穩(wěn)定,在操作過程中可能脫落等問題。在前期工作中,我們利用反膠團溶脹法制備出了超大孔的聚苯乙烯微球,孔徑可達300nm以上。該方法操作簡便易實施,設備要求比較
3、低,效果也較好,但是最終得到的介質也為疏水性介質。受該方法的啟發(fā),用其反向機理—表面活性劑膠團溶脹法制備大孔生物分離介質,成功制備得到了孔徑分布在100nm左右的魔芋葡甘聚糖(Konjacglucomannan,KGM)微球,并對大孔的形成機理進行了研究。
論文工作分為三個部分。第一部分綜述了親水性大孔分離介質提出的背景、研究意義、國內外研究進展、本論文的目的和創(chuàng)新點等問題。第二部分提出了表面活性劑膠團溶脹法制備魔芋葡甘聚糖大
4、孔微球的新思路,具體介紹了整個實驗的制備工藝。第三部分通過對表面活性劑的類型、魔芋葡甘聚糖溶液濃度、表面活性劑用量以及助表面活性劑用量等對微球的形貌和產率的影響因素進行了考察,優(yōu)化了反應條件,初步探討了大孔的形成機理。并對優(yōu)化實驗得到的微球進行了表征,得到了孔徑在100nm左右,表面有明顯孔道分布的介質。從實驗所得到的結論可以得出,含有大量水溶性表面活性劑的水相分散到油相后,水相液滴內大量的膠團會從外油相吸收大量的油,進而溶脹,形成油/
5、表面活性劑/水(W/S/O)雙連續(xù)乳液,交聯過程中會發(fā)生相分離,內油相所占的體積部分就形成大孔。濕球通過CO2臨界點干燥儀進行干燥,得到微球干粉,通過JSM-6700F冷場發(fā)射掃描電子顯微鏡、IV9500全自動壓汞儀、ASAP2020BET比表面積測定儀等手段對微球的表面結構,孔徑大小,孔徑分布等進行了測定。
研究結果表明,通過表面活性劑膠團溶脹法制備大孔微球,方法簡單,操作簡便易行,生物相容性較強,可以直接用于生物大分子的分
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