Fe3O4@TiO2-ZrO2制備及其對(duì)磷酸肽富集.pdf

1、蛋白質(zhì)磷酸化，是指蛋白質(zhì)翻譯后修飾中一種極其重要的現(xiàn)象，影響著許多重要的生命活動(dòng)，如代謝調(diào)節(jié)，基因表達(dá)以及細(xì)胞分裂等等。由于蛋白質(zhì)磷酸化具有高度的動(dòng)態(tài)性和低化學(xué)計(jì)量性，因此在質(zhì)譜分析前對(duì)磷酸肽進(jìn)行富集具有重大意義。
　　在本論文中首次合成了一種二元金屬氧化物二氧化鈦與二氧化鋯包覆四氧化三鐵的磁性微球Fe3O4@TiO2-ZrO2，并將其用于磷酸肽的選擇性富集研究中。所合成材料的結(jié)構(gòu)、成分等特性通過掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡、能

2、量散射X射線光譜儀、傅立葉紅外光譜儀、粉末X射線多晶衍射技術(shù)、氮吸附技術(shù)以及振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)進(jìn)行了表征，表征結(jié)果顯示，金屬氧化物被成功的包覆在Fe3O4微球的表面，F(xiàn)e3O4@TiO2-ZrO2磁性微球粒徑約為230nm的球形顆粒，其中功能性金屬氧化物包覆層的厚度約30nm，且擁有較好磁性。在磷酸肽富集實(shí)驗(yàn)中，以β-酪蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白進(jìn)行磷酸肽富集條件的優(yōu)化，并通過離子阱質(zhì)譜(ITMS)對(duì)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)用β-酪蛋白和牛血清白蛋白模擬半

3、復(fù)雜樣品以及用牛奶作為實(shí)際樣品，分別考察材料從半復(fù)雜樣品以及實(shí)際樣品中富集磷酸肽的能力。
　　研究得出磷酸肽富集最佳條件為:上樣溶液中乙腈(ACN)濃度為60％，用三氟乙酸(TFA)調(diào)節(jié)緩沖液的pH值為2，加入1mol/L的酒石酸作為非磷酸肽抑制劑。在最佳條件下，所制備材料從標(biāo)準(zhǔn)蛋白中富集磷酸肽的檢測(cè)限達(dá)到10-10mol/L。同時(shí)對(duì)半復(fù)雜樣品以及牛奶中的磷酸肽均能高效富集。Fe3O4@TiO2和Fe3O4@ZrO2分別傾向于富集