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1、模擬生物體內(nèi)濃度梯度的環(huán)境對(duì)生物學(xué)細(xì)胞分析具有很重要的意義,而迅速發(fā)展的微流控技術(shù)成為了研制新型濃度梯度生成器的新平臺(tái)。本文研究基于層流原理,設(shè)計(jì)了一種新的雙層微流控濃度梯度生成器,以此可以產(chǎn)生精確、可控、穩(wěn)定、可以定量的濃度梯度;并且在此芯片的基礎(chǔ)上進(jìn)行了幾種抗癌藥物和心血管藥物的篩選。
首先,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種新的雙層微流控濃度梯度生成器和細(xì)胞引入裝置,在傳統(tǒng)的“圣誕樹”結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上加一層細(xì)胞引入裝置,在實(shí)現(xiàn)芯片中不同液流分流
2、、混合,再分流、再混合,從而形成濃度梯度的同時(shí),對(duì)引入的細(xì)胞的分布也可以實(shí)現(xiàn)控制,并且可以減小流體對(duì)細(xì)胞的剪切力。
在實(shí)驗(yàn)中,我們優(yōu)化了芯片的細(xì)胞培養(yǎng)腔室大小,考察了不同流速下芯片中濃度梯度的分布情況,并以羅丹明123為熒光染料對(duì)生成的濃度梯度進(jìn)行了熒光定量。結(jié)果顯示,微量注射泵以0.1μL/min的流速向芯片內(nèi)通入液體時(shí),形成的濃度梯度線性最好,在0.5-1 h內(nèi)可以達(dá)到穩(wěn)定,具有精確、可控、穩(wěn)定、可以定量等優(yōu)點(diǎn)。
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