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文檔簡介
1、利用大規(guī)模哺乳動物細胞培養(yǎng)生產具有醫(yī)用價值的生產因子、干擾素、激素、疫苗、單抗和酶等,已成為生物制藥高技術產業(yè)鏈的核心。由于哺乳動物細胞培養(yǎng)過程中,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等代謝廢物的積聚,抑制了哺乳動物細胞的生長,大幅提高了哺乳動物細胞的培養(yǎng)成本。如何及時去除這些代謝物,優(yōu)化哺乳動物細胞培養(yǎng)環(huán)境,進而提高哺乳動物細胞產率、降低動物細胞培養(yǎng)成本和生物制品的成本,是生物醫(yī)藥制品規(guī)?;a和普及亟待解決的問題,具有重要的應用價值。
2、r> 針對上述問題,本論文選取Vero(非洲綠猴腎細胞)哺乳動物細胞株為研究對象,通過細胞相對活性、生長狀態(tài)變化、乳酸脫氫酶濃度以及細胞凋亡對納米級凹凸棒土(NATP)的生物學毒性進行評價,并對其與哺乳動物細胞的作用機制進行探索性研究。具體研究內容如下:
(1)納米級凹凸棒土制備方法研究。分別利用六偏磷酸鈉、鹽酸和聚丙烯酸鈉結合超聲方法對工業(yè)化用的凹凸棒土進行二次分散提純,通過FTIR、TEM和Zeta電位對制備的納米級凹凸
3、棒土顆粒進行評價。研究結果表明三種處理方法中,聚丙烯酸鈉分散獲得的凹凸棒土穩(wěn)定性最好,其次是六偏磷酸鈉分散處理凹凸棒土,穩(wěn)定性最不好的是鹽酸分散處理的凹凸棒土。
(2)納米級凹凸棒土細胞毒性研究。通過與納米級凹凸棒土共培養(yǎng)的Vero哺乳動物細胞的生長狀態(tài)、細胞相對活性、細胞的凋亡、DNA的電泳、及培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶的濃度變化等方面的實驗,對納米級凹凸棒土細胞毒性進行研究。研究結果表明:在一定的濃度范圍內,納米凹凸棒土材料對細
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