
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1、基于生物識(shí)別的高度專一性與電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)的放大作用相結(jié)合的電化學(xué)生物傳感器,是一個(gè)涉及生物、化學(xué)、物理、材料、醫(yī)學(xué),以及納米技術(shù)、信息技術(shù)、微電子技術(shù)等多學(xué)科技術(shù)在內(nèi)的交叉領(lǐng)域。具有靈敏度高、選擇性好、易于微型化和自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),在生物分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、臨床診斷等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。在電化學(xué)生物傳感器的研制中,一個(gè)關(guān)鍵的技術(shù)就是如何將生物材料穩(wěn)定、高活性地固定到基體電極表面,構(gòu)成生物傳感器的敏感膜。本研究工作致力于發(fā)展基于納米材料的新型
2、電化學(xué)生物傳感器,主要完成了以下研究工作:
1.制備了基于碳納米管的的新型過氧化氫生物傳感器
本研究用帶負(fù)電荷的MWNT吸附表面帶正電荷的HRP,以PVB作為復(fù)合固酶基質(zhì),制備了HRP/PVB/MWNT修飾玻碳電極并將其用于H2O2的生物傳感。以對(duì)苯二酚為電子媒介,采用循環(huán)伏安法和電流時(shí)間法考察了該傳感器對(duì)H2O2的催化性能。討論了單因素媒介體對(duì)苯二酚濃度、工作電位、溫度、pH值對(duì)傳感器響應(yīng)的影響。得到單因素作用下最
3、佳實(shí)驗(yàn)條件為室溫25℃,pH值=7.0,對(duì)苯二酚濃度4.2mmol/L,工作電位-250mV。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,借助于Design Expert軟件對(duì)對(duì)苯二酚濃度、pH值、工作電位三個(gè)實(shí)驗(yàn)因素進(jìn)行了響應(yīng)面分析。在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi),三個(gè)實(shí)驗(yàn)因子對(duì)響應(yīng)電流的影響由大到小依次為pH值、對(duì)苯二酚濃度、工作電位。通過模擬得到一個(gè)能較好預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的二次模型。應(yīng)用響應(yīng)面分析法得到的最佳實(shí)驗(yàn)條件為:對(duì)苯二酚濃度3.9mmol/L,pH值為6.9,工作電位
4、-253mV。在單因素實(shí)驗(yàn)最優(yōu)條件下,傳感器對(duì)H2O2測(cè)定的線性范圍在1.67×10-7~8.90×10-4mol/L,檢出限(S/N=3)為5.55×10-8mol/L。實(shí)驗(yàn)對(duì)傳感器的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性及抗干擾性進(jìn)行了考察,同一傳感器具有較好的重現(xiàn)性及穩(wěn)定性。在抗干擾性方面,20倍的葡萄糖、乙醇、乙酸、檸檬酸、甘氨酸對(duì)傳感器均無明顯干擾,5倍的抗壞血酸存在一定的干擾。
2.將研制的過氧化氫傳感器與紫外分光光度法,高效液相色譜法兩
5、種檢測(cè)方法作了對(duì)比研究。
實(shí)驗(yàn)通過紫外分光光度法對(duì)H2O2進(jìn)行了測(cè)定。H2O2含量在6.67×10-7~1.33×10-5mol/L范圍內(nèi)與吸光度呈線性關(guān)系,最低檢出限為2.22×10-7mol/L。通過用反相高效液相色譜-紫外檢測(cè)色譜法,在C18柱上對(duì)過氧化氫進(jìn)行了測(cè)定。檢出過氧化氫的線性范圍在1.00×10-6~2.40×10-6mol/L,最低檢出限為3.33×10-7mol/L。相比而言,過氧化氫電化學(xué)傳感器線性范圍寬
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