2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、蓖麻毒素是一種核糖體失活蛋白,由A、B兩條鏈通過二硫鍵連接而成,其中B鏈具有半乳糖結(jié)合位點(diǎn),可以介導(dǎo)毒素蛋白進(jìn)入細(xì)胞;而A鏈?zhǔn)腔钚枣?,具有糖苷酶活性,通過水解核糖體RNA上的N-糖苷鍵使得腺嘌呤脫落導(dǎo)致核糖體失活,導(dǎo)致蛋白合成障礙,引起細(xì)胞死亡。由于蓖麻毒素具有極強(qiáng)的毒性、提取方法簡便,極易被恐怖分子利用,因此已被列入《禁止化學(xué)武器公約》的第一類控制清單之中。為應(yīng)對蓖麻毒素的潛在威脅,建立快速的分析檢測方法具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義和軍用價

2、值。
   目前,對蓖麻毒素的分析檢測方法主要集中在兩個方向,一個是基于抗體的免疫學(xué)方法,另外一個就基于生物質(zhì)譜的儀器分析方法。本課題從合成磁性Fe3O4納米顆粒入手,建立了基于半乳糖功能化磁性Fe3O4納米顆粒富集的免疫學(xué)分析檢測方法,同時還建立了基于半乳糖功能化磁性Fe3O4納米顆粒富集蓖麻毒素液相色譜三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS/MS)的儀器分析方法。基于上述內(nèi)容,本論文分為三章:
   第一章簡要介紹了蓖麻毒

3、素的生化特性以及目前分析檢測研究進(jìn)展,并對磁性Fe3O4的合成、穩(wěn)定性、功能化修飾以及在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用做了簡單的概述。并在此基礎(chǔ)提出了本論文的立題依據(jù)、研究意義和研究思路。
   第二章建立了基于半乳糖功能化磁性Fe3O4納米顆粒檢測緩沖液和血清樣品中蓖麻毒素的分析方法。首先采用化學(xué)共沉淀法合成磁性Fe3O4納米顆粒,通過包被硅烷化試劑得到氨基化的磁性納米顆粒,再將化學(xué)修飾的半乳糖共價連接到磁性納米顆粒的表面,并對合成的磁性納

4、米顆粒進(jìn)行了表征。測定結(jié)果表明所得到的磁性納米顆粒的半乳糖載量約為30μg/mg,蓖麻毒素的結(jié)合量約為29μg/mg。將獲得的磁性Fe3O4納米顆粒用于蓖麻毒素的檢測分析,結(jié)果顯示生理緩沖液樣品中的毒素在2-64 ng/mL范圍內(nèi)線性良好,檢測限為2 ng/mL,而血清樣品中添加的毒素在4-64 ng/mL范圍內(nèi)線性良好,檢測限為4 ng/mL。該方法檢測時間短(3小時),血清樣品干擾小,可用于快速分析檢測樣品中所含的蓖麻毒素。

5、   第三章建立了基于LC-MS/MS檢測蓖麻毒素的方法。首先基于前期工作選取了蓖麻毒素胰酶酶解所產(chǎn)生的特異性肽段,并對其進(jìn)行了篩選,選擇出用于定性、定量的肽段,對選取的肽段進(jìn)行了質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化;再在半乳糖功能化磁性Fe3O4納米顆粒的富集濃縮的基礎(chǔ)上將所建立的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)用于蓖麻毒素的定量分析,該方法在毒素濃度為5 ng/mL-1μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系,最低檢測限可達(dá)到2 ng/mL,這與普通酶鏈免疫分析的靈敏度相當(dāng)

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