CyclinD1、NF-κBp65和β-catenin在食管癌中表達(dá)及其生物學(xué)意義.pdf

1、目的:通過對食管鱗癌組織中CyclinD1、NF-κBp65和β-catenin基因及蛋白表達(dá)的檢測,探討CyclinD1、NF—KBp65和β-catenin在食管癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤、轉(zhuǎn)移過程中的作用以及它們之間的相關(guān)性,為臨床食管癌診療與判斷預(yù)后提供有價(jià)值的參考指標(biāo)。
　　 方法:
　　 1.應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測80例食管鱗狀細(xì)胞癌、癌旁、正常食管粘膜中CyclinD1 mRNA的表達(dá)水平。
　　

2、 2.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測40例食管鱗狀細(xì)胞癌、30例不典型增生組織和20例正常食管粘膜中β-catenin蛋白含量,其中蛋白的表達(dá)量用平均熒光強(qiáng)度(均道值)來表示。
　　 3.應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測59例食管鱗狀細(xì)胞癌、25例不典型增生組織和15例正常食管粘膜中NF-κBp65的蛋白表達(dá)。
　　 4.應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測72例食管鱗狀細(xì)胞癌、40例不典型增生組織和40例正常食管粘膜中β-catenin蛋白

3、的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.RT-PCR方法檢測CyclinD1在不同食管組織中的表達(dá)應(yīng)用RT-PCR方法檢測80例食管鱗狀細(xì)胞癌、不典型增生組織和正常粘膜中CyclinD1 mRNA的表達(dá),結(jié)果顯示:CyclinD1在癌組織中的表達(dá)顯著高于不典型增生組織和正常粘膜(P均<0.05),CyclinD1的表達(dá)與患者的性別、年齡無關(guān)(P均>0.05),而與細(xì)胞分化程度(P<0.05)、浸潤深度(P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

4、移有關(guān)(P<0.01)。
　　 2.FCM方法檢測β-catenin蛋白在不同食管組織中的表達(dá)應(yīng)用FCM技術(shù)對40例食管鱗狀細(xì)胞癌、30例不典型增生組織和20例正常粘膜中β-catenin蛋白表達(dá)量(平均熒光強(qiáng)度、均道值)的檢測結(jié)果顯示:癌組織中β-catenin蛋白表達(dá)量(558.14±57.60)顯著低于不典型增生組織(665.61±73.38)和正常粘膜(732.64±65.60)(P<0.01)。且β-catenin蛋白

5、含量與細(xì)胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05),而與與浸潤深度和患者的性別、年齡無關(guān)(P>0.05)。
　　 3.NF-κBP65在不同食管組織中的表達(dá)59例食管鱗狀細(xì)胞癌、25例食管不典型增生組織和15例正常食管粘膜中NF-κBp65蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示NF-κBP65在癌組織的陽性表達(dá)率(61.0％)明顯高于非典型增生組織(20％)和正常粘膜(13.3％),癌組織的陽性表達(dá)率與非典型增生組織和正常粘膜的陽性表達(dá)率之間有顯

6、著性差別(P<0.01)。在9例中度非典型增生組織的陽性表達(dá)3例(33.3％),在16例輕度非典型增生組織的陽性表達(dá)2例(12.5％),在15例正常粘膜中陽性表達(dá)1例(13.3％),非典型增生組織的陽性表達(dá)和正常粘膜中陽性表達(dá)之間呈逐漸增高趨勢但他們之間的差別無顯著性(P>0.05),可能與標(biāo)本例數(shù)少或取材有關(guān)。NF-κBP65在胞漿中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小、細(xì)胞分化程度、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)。NF—KBP65在胞核中

7、的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小、細(xì)胞分化程度無關(guān)(P>0.05),但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤深度有關(guān)(P<0.05)。
　　 4.IHC法檢測β-catenin在不同食管組織中的表達(dá)72例食管鱗狀細(xì)胞癌、40例食管不典型增生組織和正常粘膜中β-catenin蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示:β-catenin在癌組織中的異常表達(dá)率(61.1％)明顯高于不典型增生組織(27.5％)和正常粘膜(7.5％)(P<0.01),并隨組織類型不同有升高的

8、趨勢。β-catenin的表達(dá)與患者的性別、年齡、浸潤深度無關(guān)(P>0.05),但與細(xì)胞分化程度(P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.食管鱗狀細(xì)胞癌中CyclinD1 mRNA的表達(dá)水平顯著高于食管不典型增生組織和食管正常粘膜,提示細(xì)胞中cyclinD1的異常表達(dá)可能參與了食管癌的發(fā)生與發(fā)展；CyclinD1 mRNA表達(dá)水平與癌細(xì)胞浸潤深度、細(xì)胞分化程度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),與性別

9、和年齡無關(guān),提示CyclinD1可能參與調(diào)節(jié)食管癌的惡性度轉(zhuǎn)化,并參與了食管癌的浸潤與轉(zhuǎn)移。
　　 2.NF—KBP65在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于食管非典型增生組織和正常粘膜,提示NF—KBP65表達(dá)可能參與食管癌的發(fā)生,NF-κBP65胞核過表達(dá)與侵潤程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),NF-κBP65胞漿過表達(dá)與侵潤程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān),提示可能NF-κBP65非活化形式是在細(xì)胞胞漿中表達(dá),而胞核表達(dá)是其活化形式,通過活化(胞核表達(dá)

10、)發(fā)揮重要的生物學(xué)作用,即促進(jìn)食管癌浸潤轉(zhuǎn)移。
　　 3.食管鱗狀細(xì)胞癌中的β-catenin蛋白異常表達(dá)(在細(xì)胞漿中表達(dá))水平明顯高于食管不典型增生組織和食管正常粘膜,提示β—catenin蛋白在細(xì)胞漿中的異常表達(dá)水平增多可能參與食管癌的發(fā)生與發(fā)展；β-catenin蛋白在細(xì)胞漿中的異常表達(dá)水平與細(xì)胞分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),提示β-catenin蛋白細(xì)胞漿中異常表達(dá)參與了食管癌的浸潤與轉(zhuǎn)移以及細(xì)胞惡性度的轉(zhuǎn)化。